无核抗寒葡萄胚挽救育种与分子标记辅助选择应用

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本研究以5个欧洲无核葡萄作母本,3个抗寒性强的中国野生葡萄作父本,共配置7个杂交组合,通过胚挽救技术对杂交胚珠进行离体培养和胚萌发成苗培养并对胚发育培养基进行优化。运用分子标记辅助选择,使用无核和抗寒标记对获得的杂种株系进行无核和抗寒性状的早期鉴定。取得的主要结果如下:1、7个无核×抗寒杂交组合共获得杂交果实4341个,接种胚珠5079个,杂种胚1607个和杂种后代537个。杂交组合昆香无核×双优的胚发育率和成苗率最高,分别为49.37%和18.21%,杂交组合红宝石无核×北醇获得成苗数最高为350株。2、不同母本基因型对胚挽救成苗影响不同,以双优为父本,红脸无核、无核白和昆香无核为母本的杂交组合的胚发育率分别为39.00%、19.26%和45.39%,成苗率分别为9.50%、8.15%和16.31%,以北冰红为父本,红脸无核、美丽无核、无核白为母本的杂交组合的胚发育率分别为13.33%、10.34%和7.64%,成苗率分别为6.59%、1.48%和1.91%;不同父本基因型对胚挽救成苗影响不同,以红脸无核为母本的2个杂交组合红脸无核×北冰红和红脸无核×双优,胚发育率分别为13.33%和39.00%,成苗率分别为6.59%和9.50%;以无核白为母本的杂交组合无核白×北冰红和无核白×双优的胚发育率分别为7.64%和19.26%,成苗率分别为1.91%和8.15%。3、不同基本培养基对胚挽救的影响不同。对接种于MM3和ER基本培养基上胚珠的胚发育率和成苗率比较发现,MM3均高于ER培养基。4、不同氨基酸对不同杂交组合的影响不同。对于杂交组合昆香无核×双优,添加天冬酰胺、谷氨酰胺和丝氨酸的胚发育率(47.86%、59.69%、53.33%)均高于对照(45.39%)。以MM3+2.5mmol·L-1谷氨酰胺培养昆香无核×双优的胚珠获得的胚发育率(59.7%)最高,半胱氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺处理的杂种胚珠获得成苗率为18.67%、20.93%、21.43%,高于对照的16.31%;对于杂交组合红宝石×北醇,添加半胱氨酸、天冬酰胺的胚发育率(47.13%、55.71%)高于对照46.00%,天冬酰胺、谷氨酰胺和丝氨酸添加后的成苗率(21.43%、22.22%、18.82%)高于对照17.33%。5、利用无核标记GSLP1-569、SCC8-1018和抗寒分子标记S241-717,共检测了6个杂交组合的83个杂种株系,其中携带无核分子标记的杂种株系49个,抗寒分子标记的杂种株系55个,同时具有无核和抗寒标记的杂种株系35个。
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