应用不同材料的人工组织神经修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究

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目的1.研究海洋生物单环刺缢(Urechis unicinctus)体壁的结构特点,以及单环刺缢体壁去细胞后的抗原性及组织相容性。研究以去细胞的单环刺缢体壁制成神经导管,其内充填吸收性胶原海绵(体原素),加入神经营养因子构成人工组织神经移植物桥接周围神经缺损的效果。2.研究以去细胞的单环刺缢体壁制成神经导管,其内充填去细胞的同种异体神经,加入神经营养因子构成人工组织神经移植物的组织相容性及桥接周围神经缺损的效果。3.研究带蒂的神经周围组织筋膜瓣反转缝合成神经导管,其内充填可吸收性胶原海绵(体原素),加入神经营养因子构成人工组织神经移植物桥接周围神经缺损的效果。方法1.取健康成年SD大鼠40只,随机分成实验组一、自体神经组、硅胶管组、正常组。用化学方法对单环刺缢体壁进行去细胞,常规HE染色,观察单环刺缢体壁去细胞前后的组织结构。分别将去细胞和未去细胞的单环刺缢体壁缝合于大鼠的皮下,术后4周取材,HE染色,观察炎性细胞浸润情况。将去细胞的单环刺缢体壁缝合成与大鼠坐骨神经粗细相匹配的导管,其内充填可吸收性胶原海绵(体原素),加入神经营养因子,构成人工组织神经移植物桥接大鼠10mm坐骨神经缺损。术后4个月,通过大体观察,电生理检查,组织形态学观察,了解该种人工组织神经桥接大鼠坐骨神经缺损的疗效。2.取健康成年SD大鼠40只随机分成实验组二、自体神经组、硅胶管组、正常组。将去细胞的单环刺缢体壁缝合成与大鼠坐骨神经粗细相匹配的导管,其内充填化学方法去细胞的异体神经,加入神经营养因子,构成人工组织神经移植物桥接大鼠10mm坐骨神经缺损。术后4个月,通过大体观察,电生理检查,组织形态学观察,了解该种人工组织神经桥接大鼠坐骨神经缺损的疗效。3.取健康成年SD大鼠40只随机分成实验组三、自体神经组、硅胶管组、正常组。取神经缺损处长度为10mm的自体周围组织筋膜瓣,一侧带蒂,长宽比例为1,以筋膜表面为管内壁缝合成管状,使之成为有血液循环的神经导管,其内填充医用吸收性胶原海绵(体原素),加入神经营养因子,构成人工组织神经移植物桥接大鼠10mm坐骨神经缺损。术后4个月,通过大体观察,电生理检查,组织形态学观察,了解该种人工组织神经桥接大鼠坐骨神经缺损的疗效。结果1.观察大鼠肌肉萎缩情况、肢体活动情况、切口愈合状况及大鼠身体状况显示:术后4个月实验组三与自体神经组效果接近,并优于实验组一、二;实验组一、二疗效接近,并优于硅胶管组。2.电生理结果显示术后4个月时,电生理学检查动作电位潜伏期(ms),动作电位波幅(mV)正常组优于其它各组,自体神经组和实验组三组差异无显著性,实验组一与实验组二间差别无显著性,实验组三优于实验组一与实验组二,差异有显著性,以上各组均优于硅胶管组,差异有显著性。3.组织形态学观察:3.1通过脊髓HE染色、尼氏染色、HRP逆行示踪标记脊髓前角运动神经元的方法,显示术后4个月脊髓前角运动神经元和神经元细胞突起的数量,以及通过免疫组化显示脑源性神经营养因子的表达情况,均为正常组多于自体神经组和实验组三,自体神经组和实验组三之间差异无显著性,实验组一与实验组二间差别无显著性,实验组三优于实验组一与实验组二,差异有显著性,以上各组均优于硅胶管组,差异有显著性。3.2通过对坐骨神经移植段远端HE染色、2R丽春红-亮绿染色、锇酸染色、电镜观察均显示神经纤维再生情况为自体神经组和实验组三之间差异无显著性,实验组一与实验组二间差别无显著性,实验组三优于实验组一与实验组二,差异有显著性,以上各组均优于硅胶管组,差异有显著性。结论1.将去细胞的单环刺缢体壁缝合成神经导管,其内充填可吸收性胶原海绵(体原素),加入神经营养因子,构成人工组织神经移植物,修复周围神经缺损是可行的,但与自体神经移植尚有差距,需进一步完善。2.将去细胞的单环刺缢体壁制成人工组织神经导管,其内充填去细胞的同种异体神经,加入神经营养因子,构成人工组织神经移植物修复周围神经缺损是可行的,但与自体神经移植尚有差距,需进一步完善。3.应用一侧带蒂的自体周围组织筋膜瓣作为神经导管,其内填充医用吸收性胶原海绵,辅加神经营养因子,构成有血液循环的人工组织神经移植物,更符合神经再生的生理要求,各项检测证明了该种材料的人工组织神经修复周围神经缺损是可行的,其效果与自体神经移植相似,可以进一步在临床中研究、应用和推广。
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