摘要 使用自行设计的引物进行扩增，成功地建立了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白基因的RT-PCR方法，获得了PRRSV N蛋白基因的全序列。将产物基因纯化并连接到T载体，转化JM109细胞，扩大培养后，提取并纯化N基因片段；将其连接进pET-28a表达载体，再对JM109细胞进行一次转化，使目的基因片段适应与表达载体的结合。用含有目的基因的表达载体转化表达菌BL21，挑选阳性菌，扩大培养，用IPTG诱导使之进行表达，对诱导表达条件进行多次探索，最终确立最佳诱导表达条件为37℃、最佳收获时间为6h。将收获的表达菌进行离心沉淀，加入裂解缓冲液后进行超声波裂解，离心取上清，电泳结果分析证明分子量大小合适。经western-blot鉴定和镍柱亲合层析纯化后的活性验证，表明可作为竞争ELISA抗原。为解决使用进口检测试剂盒的高成本和实用性问题奠定了基础。