鲤疱疹病毒Ⅱ型（Cyprinid herpesvirus 2,Cy HV-2）是一种能够感染金鱼和鲫鱼及鲫鱼变种的双链DNA病毒,该病毒病流行范围广,蔓延迅速,鲤疱疹病毒Ⅱ型引起的鲫造血器官坏死病也是我国重点监测的疫病,对我国的鲫鱼养殖业危害巨大,已成为鲫鱼养殖业健康发展的严重影响因素之一。研究鲤疱疹病毒的毒力基因对于鲤疱疹病毒的致病机理的研究以及弱毒疫苗的研制有着重要作用。本论文选取ORF57、ORF104和TK这3个编码蛋白的基因进行研究,取得了如下结果:1、设计siRNA抑制基因表达:通过在异育银鲫脊髓细胞系（Spinal cord tissue cell lines of Carassius auratus gibelio,CSC）中对Cy HV-2中3个基因进行RNA干扰,探究其对Cy HV-2病毒复制的影响。首先,以FAM标记干扰异育银鲫β-actin基因的si RNA进行CSC细胞转染条件的优化,再针对Cy HV-2中3个基因的3个不同位点设计siRNA,转染CSC细胞,并进行病毒感染,评估si RNA对病毒复制和致细胞病变的影响。结果表明:si RNA-ORF57-2、si RNA-ORF104-1、si RNA-ORF104-2、si RNA-TK-2能够降低病毒的lg TCID50值,在接种病毒后第48h（转染后第72h）在m RNA水平上也表现出相对抑制表达的效果（较Mock组）,其中,表明ORF57、ORF104和TK基因对病毒的毒力存在的潜在的影响。2、原核表达载体构建及多抗制备:本研究针对CyHV-2中ORF104、TK设计特异性引物,扩增目的片段经酶切连接至原核表达载体p ET-28a,转化成BL21（DE3）p Lys S大肠杆菌中,成功表达出ORF104和TK蛋白,纯化ORF104、TK重组蛋白后,制备兔抗多克隆抗体。另人工合成ORF57多肽片段免疫新西兰大耳兔制备多克隆抗体。使用上述抗体对细胞病毒培养物进行Western Blot检测。结果表明,ORF104蛋白纯化后目的片段出现在40k Da左右,TK蛋白纯化后目的片段出现在35k Da左右。ORF104和TK的重组蛋白与人工合成ORF57多肽片段制备的多克隆抗体都可以特异性的识别对应的重组蛋白或多肽片段,以及感染Cy HV-2病毒的细胞培养物。结果表明针对ORF57、ORF104和TK基因的多克隆抗体可以用于Cy HV-2病原对应蛋白检测中。综上,本论文的研究涵盖了ORF57、ORF104、TK基因对应蛋白的理化性质、同源性、进化保守性,对该基因对病毒毒力的潜在影响作了初步的探究,合成的重组蛋白及制备的多克隆抗体都为今后继续研究提供了研究工具,对这三个潜在毒力基因对Cy HV-2的致病机理,蛋白的分子机制研究,以及对弱毒苗,构建基因敲除弱毒株提供了一定的参考。