TFⅡAγ在病原菌与宿主互作中的功能研究

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自然界中植物与病原菌之间的“斗争”从未停歇过。面对病原菌的挑战,植物进化出一系列的防御措施来抵抗病原菌的入侵。对于水稻而言,水稻细菌性病害如白叶枯病、细菌性条斑病等是水稻生长发育过程中的主要病害之一。在生产上,该类病害大面积流行会严重影响水稻的产量。在自然界“物竞天择,适者生存”的选择下,不同的水稻品种进化出大量的抗性基因。抗性基因资源的挖掘及抗病机制的解析不仅有助于更好的理解水稻与病原菌的互作理论,而且为水稻抗病育种提供重要的基因资源。真核生物的转录过程需要基本核心转录因子的参与。本室已有研究证实水稻基本核心转录因子OsTFⅡAγ5在白叶枯病菌和细菌性条斑病菌与水稻的互作过程中发挥重要作用。这两种病原细菌通过他们TAL效应子的TFB区与水稻基本核心转录因子OsTFⅡAγ5互作,而抗病基因xa5/OsTFⅡAγ5V39E却不能与TAL效应子的TFB区互作。抑制OsTFⅡAγ5基因的表达可提高水稻对白叶枯病菌和细菌性条斑病菌的抗性。为了探究OsTFⅡAγ5基因在病原细菌与水稻的互作过程中的功能,本研究利用CRISPR-cas9基因编辑技术对水稻OsTFⅡAγ5基因进行敲除。研究结果发现,敲除OsTFⅡAγ5基因可以增强水稻对多种白叶枯病菌致病小种和细菌性条斑病菌致病小种的抗性,TAL效应子的靶标基因Xa13/Os8N3/SWEET11、OsTFX1、OsHEN1和OsTFⅡAγ1的表达均不受到病原细菌的激活。水稻基本核心转录因子OsTFⅡA的γ亚基包含两个同源基因OsTFⅡAγ5和OsTFⅡAγ1,而目前并不清楚两者在病原菌与宿主的互作过程及mRNA的转录过程中的作用。为了研究水稻OsTFⅡAγ基因的功能,本研究在前期实验的基础上构建了OsTFⅡAγ1基因的敲除材料,期望通过研究OsTFⅡAγ5基因和OsTFⅡAγ1基因的敲除突变体,进一步解析水稻OsTFⅡAγ基因的功能。为了探究TFⅡAγ在其他物种中的功能,本研究通过序列比对分析了柑橘、辣椒和番茄中TFⅡAγ的氨基酸序列,结果发现TFⅡAγ基因在柑橘、辣椒和番茄中具有很高的一致性。抑制柑橘、辣椒和番茄中TFⅡAγ基因的表达可增强植株对对应病原细菌的抗性。
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