枯草杆菌安舒克栓酶随机突变、筛选及其部分性质研究

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本试验室构建了带有枯草杆菌安舒克栓酶基因的质粒pUBH。该质粒在蛋白酶缺陷型表达受体菌DB403中能够实现正确表达枯草杆菌安舒克栓酶(AT)。AT对纤维蛋白有直接的降解作用,有望成为一种新型的溶栓药物。但它还存在一些缺陷,例如酶活有待提高。为了克服AT自身的缺点,需要对该分子进行改造。由于不能清楚的知道AT结构和功能之间的对应关系,因此不能通过分子设计对蛋白进行功能改造。而目前解决这一难题的有效方法是分子进化工程。该工程策略是:模拟蛋白质分子自然进化过程,在目的蛋白质的基因中引入随机突变,然后筛选出性状优良的突变体。本研究采用了两种突变方法来获得突变体;通过两级筛选方法获得性状优良的突变体,并对突变酶的性质进行了研究。
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