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海藻是生物活性物质的主要来源之一,富含各类营养成分,包括多糖、蛋白质、多不饱和脂肪酸、类胡萝卜素、多酚、萜类等。江蓠(Gracilaria)是一种大型底栖海藻,属于红藻门,真红藻纲,杉藻目,江蓠科,广泛分布于热带和亚热带海域。江蓠多糖含量很高,并且具有免疫调节、抗肿瘤、抗炎症、抗氧化、降血糖、抗病毒、抑菌等多种功效。红江蓠是我国特有的江蓠品种,有关红江蓠多糖的报道较少。本文拟从红江蓠中提取多糖并分离、纯化,并对其组成进行初步鉴定,了解其在模拟消化、体外酵解中的变化以及其抗氧化、免疫调节活性。1.红江蓠多糖的分离纯化及理化性质采用热水浸提法从红江蓠中提取粗多糖GRPS,经过DEAE-52 cellulose和Sephadex G-50 的分离、纯化得到三个组分 GRPS-1-1、GRPS-2-1、GRPS-3-2。经鉴定 GRPS-1-1、GRPS-2-1、GRPS-3-2 的总糖含量分别为 45.61 ± 1.44%、54.78±0.59%、52.72 ±0.91%；硫酸基含量分别为 5.96 ±0.91%、8.46 ±0.75%和 12.03±0.80%;糖醛酸含量较少,均低于2%;只有GRPS-1-1中含有蛋白质,其蛋白质含量为0.16±0.04%。2.红江蓠多糖的初步结构鉴定采用高效液相色谱检测GRPS-1-1、GRPS-2-1、GRPS-3-2的相对分子量,分别为1310kD,691kD,923kD。采用柱前衍生化法测定GRPS-1-1、GRPS-2-1、GRPS-3-2的单糖组成,这三种纯化组分都是由半乳糖和岩藻糖组成,摩尔比分别为 1.79:1,2.16:1,2.76:1。通过红外光谱测定,GRPS-1-1、GRPS-2-1、GRPS-3-2,都呈现硫酸多糖的典型特征。3.红江蓠多糖的模拟消化和体外酵解模拟口腔、胃部、小肠消化条件,测定消化过程中相对分子量、单糖、还原糖的变化,结果显示GRPS没有被降解。从粪便中分离肠道菌群,模拟体内肠道菌群的发酵条件,测定发酵过程中相对分子量、单糖、pH、总糖含量、SCFAs含量以及肠道菌群结构的变化,发现GRPS能够被菌群降解为低分子量的糖类之后直接利用,发酵液的pH明显下降,短链脂肪酸的总量上升,其中乙酸、丙酸和异丁酸的生成量显著增加。GRPS发酵还可以改善肠道菌群的结构,降低拟杆菌与厚壁菌的比值,促进一些能够分解多糖的菌种的生长,代谢利用GRPS,为菌群的生长提供能量。4.红江篱多糖的抗氧化与免疫调节GRPS、GRPS-1-1、GRPS-2-1、GRPS-3-2的超氧阴离子清除力和抑制脂质过氧化能力较强,具有一定的ABTS清除力和DPPH清除力;除了 GRPS-1-1之外其余样品的羟基自由基清除力都较弱；所有样品的金属螯合力都很弱,均低于 20%。GRPS-1-1、GRPS-2-1、GRPS-3-2 能抑制 H202诱导的 PC12 细胞损伤,提升细胞的存活率,呈现良好的抗氧化效果。GRPS-1-1、GRPS-2-1、GRPS-3-2 均能促进 RAW264.7 生长,其中 GRPS-3-2增殖指数最高,进行后续实验发现GRPS-3-2可以显著提高RAW264.7细胞吞噬能力、酸性硫酸酶活性和NO生成量,具有较强的免疫调节活性,可能与其硫酸基含量较高有一定的联系。