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目的探讨高浓度氧气暴露下白介素17A(IL-17A,IL-17的主要活性成分之一)在免疫细胞与Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECII)间相互作用中的影响,并探讨了红景天苷(salidroside,Sal)在此过程中的治疗效果以期为临床用药提供可靠的理论依据。方法15只8周龄昆明小鼠随机分为5组,分别为:对照组、高氧暴露(吸入氧气浓度>90%)12 h、24 h、48 h、72 h组。检测HE染色、Mason三色染色选定最佳高氧暴露时间。确定最佳高氧暴露时间后,32只8周龄昆明小鼠随机分为四组:对照组、高氧组、高氧+红景天苷组(100mg/kg/天)、高氧+Y-320组(Y-320为IL-17抑制剂,2 mg/kg/天)。Sal及Y-320分别提前3天给予灌胃,高氧暴露24 h后处死小鼠留取肺组织样本。各组分别进行:肺组织HE染色计算肺损伤评分;Mason三色染色检测肺部胶原沉积情况;肺湿干比检测肺水肿情况;铁离子试剂盒检测肺内铁死亡关键因子Fe2+含量;丙二醛(MDA)试剂盒进行肺MDA含量测定;免疫组化检测肺内IL-17RA的表达变化;免疫荧光检测IL-17和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)在肺组织内的表达情况;Western blot检测肺组织GPX4、白介素6(IL-6)、转化生长因子β1(TGF-β1)、白介素17A(IL-17A)、白介素17A受体(IL-17RA)、核因子NF-κB激活剂1(Act1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化的p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK);透射电镜下(transmission electron microscopy,TEM)观察 AECⅡ 线粒体形态。8 只8周龄昆明小鼠随机分为两组:高氧+红景天苷+重组IL-17A组(重组小鼠IL-17A,50 ug/kg,鼠尾静脉注射)、高氧+红景天苷组。各组分别进行:实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)检测 IL-17RA、Act1、GPX4 的 mRNA 的表达情况;Western blot 检测 IL-17RA、Act1、GPX4 蛋白的表达变化。结果经不同时间高氧暴露处理后的结果显示,与对照组比较,高氧暴露24 h的小鼠已出现明显的肺损伤,肺损伤评分显著增高(P<0.01),胶原纤维显著沉积(P<0.05)并伴有大量炎症细胞浸润,高氧暴露48、72 h后肺部严重损伤,不利于研究的进行,故选取24 h为后续高氧暴露时间。HE染色结果显示,与对照组小鼠相比,高氧组(24 h)小鼠肺损伤评分显著增高(P<0.001);与高氧组小鼠相比,高氧+红景天苷组小鼠及高氧+Y-320组小鼠肺损伤评分均显著降低(P<0.01)。Mason三色染色结果显示,与对照组相比,高氧组小鼠出现明显的胶原沉积(P<0.001),而高氧+红景天苷组及高氧+Y-320组小鼠与高氧组相比胶原沉积明显减轻(P<0.01)。肺湿干比显示,与对照组相比,高氧组小鼠肺湿干比显著增加(P<0.001);与高氧组相比,高氧+红景天苷组及高氧+Y-320组小鼠肺湿干比显著降低(P<0.01)。Fe2+含量测定显示,与对照组相比,高氧组小鼠肺内Fe2+含量显著增加(P<0.001);与高氧组相比,高氧+红景天苷组及高氧+Y-320组小鼠肺内Fe2+含量显著降低(P<0.001)。MDA检测显示,与对照组相比,高氧组小鼠肺内MDA含量显著增加(P<0.01);与高氧组相比,高氧+红景天苷组小鼠肺内MDA含量显著降低(P<0.01),高氧+Y-320组小鼠肺内MDA含量显著降低(P<0.05)。免疫组化结果显示,与对照组相比,高氧组小鼠IL-17RA表达水平显著增高(P<0.001);与高氧组相比,高氧+红景天苷组及高氧+Y-320组小鼠IL-17RA表达水平显著降低(P<0.01)。免疫荧光结果显示,与对照组相比,高氧组小鼠GPX4表达水平显著降低,同时IL-17表达水平显著增高(P<0.05);与高氧组相比,高氧+红景天苷组及高氧+Y-320组小鼠GPX4表达水平显著增高,同时IL-17表达水平显著降低(P<0.05)。Western blot检测结果显示,与对照组相比,高氧组小鼠GPX4表达水平显著降低(P<0.01),IL-6、TGF-β1、IL-17A、IL-17RA、Act1、TRAF6、p38 MAPK和p-p38 MAPK表达水平显著增高(P<0.05);与高氧组相比,高氧+红景天苷组及高氧+Y-320组小鼠GPX4表达水平显著增高(P<0.05),IL-6、TGF-β1、IL-17A、IL-17RA、Act1、TRAF6、p38 MAPK和 p-p38 MAPK 表达水平显著降低(P<0.05)。TEM观察结果显示,与对照组相比,高氧组小鼠AECAECⅡ线粒体形态出现铁死亡特征性改变,包括:线粒体缩小伴双层膜密度增加,线粒体脊减少或消失伴或不伴外膜破裂。与高氧组相比,高氧+红景天苷组及高氧+Y-320组小鼠AECⅡ线粒体形态显著改善。在后续的两组实验中,与高氧+红景天苷组相比,高氧+红景天苷+重组IL-17A组小鼠IL-17RA及Act1的mRNA水平显著升高(P<0.05),而 GPX4 的 mRNA 水平显著降低(P<0.05);Western blot 结果显示:与高氧+红景天苷组相比,高氧+红景天苷+重组IL-17A组小鼠IL-17RA、Act1的蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而GPX4的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论IL-17A参与了高氧肺损伤中浸润的炎症细胞及AECAECⅡ间的相互作用,其通过Act1/TRAF6/p38 MAPK通路介导高氧肺损伤中的铁死亡。此外,Sal治疗能够显著降低肺损伤小鼠炎症因子水平并改善铁死亡情况。