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目的：检测细胞间粘附分子-1(ICAM-1)在正常肝组织和肝脏肿瘤组织及细胞中的表达情况，进行人细胞间粘附分子-1的cDNA克隆及建立稳定的转染细胞株。 方法：本文采用免疫组织化学染色的方法对肝癌组织及正常肝组织进行ICAM-1的检测：根据人ICAM-1的cDNA核苷酸序列不同表达载体的特点，设计、合成基因序列特异性引物，从肝癌组织中提取总RNA，以此为模板经RT-PCR扩增得到人成熟ICAM-1的cDNA片段；然后将ICAM-1的cDNA克隆到pGEM-T Easy Vector，构建真核表达中介重组体(pGEM-ICAM-1)，再将目的片段亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1HisB；构建的真核表达重组体pcDNA3.1HisB-ICAM-1，经菌落PCR和限制性酶切有目的片段出现，进行DNA序列分析。接着利用脂质体转染技术把表达重组体pcDNA3.1HisB-ICAM-1导入QSG7701细胞，经G418筛选挑取稳定转染的细胞克隆，进一步扩增培养，抽提总RNA，进行RT-PCR，并对转染的细胞进行免疫组织化学染色。 结果：1、发现肝癌组织中ICAM-1的表达显著增加(87.5％)，呈蜂窝状改变，而且肝包膜不完整的阳性率及强度均高于肝包膜完整者，而正常肝组织中的表达很少；2、以肝癌组织中提取的总RNA为模板经RT-PCR扩增得到人成熟ICAM-1的cDNA片段大小为中南大学 博士学位论文1622hp，以 PCR产物与 T载体连接，形成中介重组体中GEM－ICAM八人 酶切后与真核表达载体连接，根据酶切鉴定和 DNA序列分析得到真核表达重组体 pCDNA3二 HISBJCAM八；3＊CAM4表达重组体在转染细胞中可稳定表达，而且以Zllg含量表达率最高。 结论：l、ICAMJ在肝癌组织中有大量表达，可能参与肝癌的发生发展和转移；入成功构建了真核表达重组体 pCDNA3二 HISB－ICAM刁，3、建立了稳定的转染细胞株；为细胞因子治疗肿瘤的研究打下一定的基础。