蛹虫草黄色素的分离鉴定、稳定性及培养条件研究

来源 :山西农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:mad1979
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本试验以蛹虫草为供试材料,采用响应面法对超声波辅助乙醇水溶液提取蛹虫草黄色素的工艺进行优化,并采用IR、UV、UPLC、MS分析蛹虫草黄色素的组成及结构。采用硅胶柱层析技术、低压反相硅胶柱层析技术及高压制备分离技术分对蛹虫草黄色素的主要组分进行纯化,并对其稳定性进行研究。为了提高蛹虫草黄色素的产量,对蛹虫草产黄色素的菌丝培养条件进行研究。试验结果如下:(1)蛹虫草黄色素的最佳提取溶剂为乙醇溶液。采用Box-Behnken试验设计和响应面分析法,得出最佳的提取工艺为:乙醇浓度57%、液料比32.00:1(mL/g)、提取时间18min。在此条件下测定实际蛹虫草黄色素的提取率为1.976±0.017mg/g。(2)蛹虫草黄色素主要是由YP-1、YP-2、YP-3、YP-4四种组分组成,其分子式分别为:C33H34O4、C34H36O4、C35H38O4、C36H40O4,其紫外吸收峰均在420nm、445nm、475nm左右,其中YP-3占到总含量的57.43%。经过硅胶柱层析、低压反相硅胶柱层析及高压制备分离得到YP-3,通过对YP-3稳定性的研究发现:YP-3分别在高温、黑暗条件下稳定,分别在pH67、Zn2+、Ca2+、Mg2+、Al3+、Na+、K+及瓜尔多胶、卡拉胶、CMC、维生素C、蔗糖素、苯甲酸钠的环境中稳定;在紫外光照射下易分解,分别在含Fe3+和含柠檬酸的环境中易分解。(3)培养条件优化试验发现:最佳的碳源为蔗糖,氮源为牛肉膏,光源为紫光。最佳培养条件为:蔗糖30g/L、牛肉膏7g/L、MgSO4 0.5g/L、KH2PO4 1.0g/L、FeSO4·7H2O0.01g/L、琼脂20g/L、PH6.5。先经过20d的黑暗培养,然后在紫光强度为250Lx的条件下培养3d。在此条件下蛹虫草菌丝体黄色素的产量可达到465ug/dish,与优化前的单因素相比提高了16.25%,优化效果显著。综上所述,蛹虫草黄色素主要是由4种结构类似的类胡萝卜素组成的,并且具有良好的稳定性。此研究结果为蛹虫草黄色素乃至其他优质天然黄色素的开发利用提供参考依据。
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