南瓜叶乙醇提取物对小鼠免疫功能的影响

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本实验以南瓜叶为原材料,研究了南瓜叶乙醇提取物的制备条件以及南瓜叶乙醇提取物的急性毒性和对小鼠免疫功能的影响,主要结论如下:1.以多酚化合物和维生素C的含量为考察指标,通过比较南瓜鲜叶、50℃干燥叶和100℃干燥叶的差异,得到50℃干燥处理南瓜叶为较优研究材料。同时,比较了水、50%乙醇、50%丙酮、50%甲醇、50%乙酸乙酯作为提取溶剂时提取物中多酚类化合物和维生素C的含量,综合考虑选择乙醇为最终提取溶剂。结合单因素试验和正交试验,确定南瓜叶乙醇提取物中多酚化合物和维生素C含量影响因素的次序为乙醇体积分数>提取温度>提取时间>料液比,优化的提取条件为乙醇体积分数55%、提取温度50℃、提取时间2h和料液比1:16gmL。提取物主要成分测定表明:水分的质量分数为10.32±0.58%,粗蛋白质的质量分数为15.96±0.71%,粗脂肪的质量分数为5.01±0.12%,总糖的质量分数为29.62-±0.69%,粗灰分的质量分数为10.77±0.11%,同时,多酚化合物和维生素C含量分别达到35.24±0.37mg/g和8.73±0.47mg/g。2.急性毒性试验表明:南瓜叶乙醇提取物属于无毒级。各剂量组均未表现出毒性反应,得知南瓜叶乙醇提取物的LD5o>18.0g/kg·bw,根据LDso剂量分级标准,属无毒级。南瓜叶乙醇提取物对小鼠的生长性能影响不显著,且性别与体重增长和食物利用率无相关性。分析发现,除白细胞计数外各剂量组小鼠血液学其他指标均在正常范围内,而在高剂量时,白细胞和血小板指标与各剂量组间有差异显著性,同时也表现出不同性别之间的差异;给药将剂量在8g/kg·bw以下,未显示出差异显著性。同时,各主要脏器的脏体比均在正常范围内,且随乙醇提取物剂量增加,胸腺指数呈下降的趋势,脾脏指数呈上升趋势。3.环磷酰胺免疫造模前,各组小鼠体重增长趋势相近,无差异显著性(P>0.05);造模成功后,免疫低下剂量组和模型组均出现体重下降的现象。同时,小鼠脏器均未出现病变,颜色和形状均正常,其脏体比均在正常范围内,尤其验证了保肝护肝作用和对胸腺和脾脏生长的促进功能。免疫调节作用研究表明,南瓜叶乙醇提取物对小鼠免疫功能有促进作用。南瓜叶乙醇提取物能增强细胞免疫功能,能显著提高小鼠的T淋巴细胞增殖能力和促进T细胞介导的免疫反应;南瓜叶乙醇提取物可提高体液免疫应答,当在较高浓度时可促进小鼠抗体生成能力,对血清溶血素的分泌影响不显著;南瓜叶乙醇提取物还可增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力,同时碳廓清试验表明:只有在适当剂量时才能显著增强免疫低下小鼠吞噬细胞的碳廓清吞噬能力,但对正常小鼠无显著影响。
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