谷氨酰胺对梗阻性黄疸大鼠TNF-α和sIL-2R的影响

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目的:梗阻性黄疸(obstructive jaundice,OJ)是肝胆外科的常见病,其治疗一直比较困难,术后常出现感染、肝肾功能不全、甚至全身炎症反应综合征(SIRS)或多器官功能不全综合征(MODS),使得病人预后不良。其机制尚未完全明确,现在普遍认为梗阻性黄疸并发的内毒素血症及机体细胞免疫功能低下是主要原因。免疫营养(immunonutrition)是近年来的研究热点,通过某些营养支持可以以特定方式刺激免疫细胞增强应答功能,调控细胞因子的产生和释放,减轻有害的或过度的炎症反应,维持肠屏障功能等。现在一些免疫营养制剂已经在临床使用,并取得了可喜的成果。梗阻性黄疸时失去了胆盐对肠道细菌的抑制作用及降解内毒素的作用,同时肠道屏障功能明显减退导致肠源性内毒素血症。内毒素刺激单核巨噬细胞产生TNF-ɑ,而TNF-ɑ是内毒素作用的主要介质,通过TNF-ɑ抑制宿主的免疫功能,病理状态下可造成机体发热,休克及多脏器功能不全综合征等,如此形成恶性循环。可溶性白细胞介素2受体(soluble interleukin-2 receptor,sIL-2R)是由活化的淋巴细胞及单核细胞产生的多肽,是一种重要的免疫抑制物质,它是免疫系统被激活的敏感指标。梗阻性黄疸病人sIL-2R明显上升,而且随梗阻时间的增加,其上升进行性增快,表明梗阻性黄疸时间越长,机体损害越大,<WP=27>免疫功能受抑制越严重,这也是梗阻性黄疸病人易发生感染及脓毒症的原因。通过动物实验研究以及部分临床研究发现免疫营养制剂的应用,如谷氨酰胺、精氨酸等的应用,可以显著改善病人的免疫状态,减少术后并发症,改善预后。本文通过建立大鼠梗阻性黄疸模型,并比较术后普通喂养组以及添加5%谷氨酰胺喂养组不同时相(术后3d、7d、14d)肝功能指标(TB、DB、ALT、ALP)、TNF-ɑ以及sIL-2R的变化,明确免疫营养对梗阻性黄疸大鼠内毒素血症介质及免疫状态的影响。方法:将60只健康Wister大鼠随机分成正常组(N组)6只、假手术组(SO组)18只、胆总管结扎普通喂养组(OJ组)和胆总管结扎加用谷氨酰胺喂养组(OJ+Gln组)各18只。后三组按术后时间(3d、7d、14d)分为3个亚组,每个亚组6只。正常组大鼠不作任何处理。其余3组大鼠术前12h禁食,不禁水。以氯胺酮2ml/kg腹腔注射麻醉。待麻醉成功后,仰卧固定于手术板上,强力碘消毒腹部后,取剑突下纵行切口2-3cm进腹,在靠近十二指肠处钝性游离胆总管,SO组手术到此为止,不结扎胆总管。OJ组及OJ+Gln组用1#线双重结扎并切断胆总管,关腹。N组、SO组、OJ组术后正常进食进水。OJ+Gln组大鼠术后即开始给予含5%谷氨酰胺的合成饲料喂养。于预定时间处死大鼠并取血样待测TB、DB、ALT、ALP,以及TNF-ɑ和sIL-2R含量。结果:SO组大鼠各肝功指标(TB、DB、ALT、ALP)与<WP=28>N组比较未见明显差异(P>.05)。OJ组OJ+Gln组大鼠肝功四项指标较假手术组均有明显升高,有显著统计学意义(P<0.01),且随着梗阻时间的延长明显升高。但OJ+Gln组各指标升高程度较OJ组明显降低,两组间各指标比较有统计学差异(P<0.05)。血清TNF-ɑ结果SO组各时相无明显升高,与N组无显著统计学意义(P>0.05)。OJ组及OJ+Gln组较正常组均有明显的升高(P<0.01),且随梗阻时相延长升高程度增加,梗阻14d时TNF-ɑ较3d时升高有明显差别(P<0.01)。该两组间比较差别有显著统计学意义(P<0.01)。血清sIL-2R结果SO组与N组比较无显著统计学意义(P>.05)。OJ组及OJ+Gln组较N组均有明显的升高(P<0.01),且随梗阻时相延长升高程度增加。OJ组与OJ+Gln组两组间比较差别有显著统计学意义(P<0.05)结论:谷氨酰胺可以改善梗阻性黄疸大鼠的免疫状态,并降低内毒素血症对机体的损害。但给予Gln治疗组各指标较正常组明显升高,所以在临床工作中,对于梗阻性黄疸病人应首先尽早去除梗阻因素,积极应用各种可能措施,改善机体免疫功能,提高机体抗感染能力,在常规治疗的同时加用免疫营养,能够改善病人的预后,降低并发症及死亡率。
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