基于AAD-DDA氢键阵列的阿昔洛韦印迹微球的研究

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受到生物学上核苷酸碱基配对的多重氢键启示,构建并证明了一种制备均一性分子印迹聚合物(MIPs)的新方法。据我们所知,这是首例使用AAD-DDA氢键阵列制备MIPs。针对模板阿昔洛韦的分子构型,设计并合成与其形成氢键阵列的新型功能单体烯丙胞嘧啶。1HNMR滴定实验的方法证明了模板和单体之间AAD-DDA氢键阵列的形成。  以烯丙胞嘧啶为单体,使用定比计量非共价印迹方法在硅胶表面制备核壳型阿昔洛韦分子印迹微球(MIMs)。扫描电子显微镜表明其具有较好的单分散性。  (1)通过考察等温吸附平衡实验评价印迹微球的吸附性能和均一性识别位点。在阿昔洛韦的DMSO/乙腈(13/87,v/v)溶液中,MIM1和非印迹微球(NIM1)的饱和吸附量分别为1.52mg/g和0.54mg/g。Scatchard分析得到结合常数为3.44×105M-1,最大表观结合位点为6.75μM/g.Langmuir-Freundlich模拟得到异质性指数为0.974,与用共价印迹法制备的MIPs具有可比性。Langmuir和Langmuir-Freundlich都证明了阿昔洛韦分子印迹微球具有均一性的识别位点。  (2)将阿昔洛韦印迹微球用作高效液相色谱(HPLC)柱固定相,和以往的MIPs-HPLC柱相比,阿昔洛韦的色谱峰在MIM1-HPLC柱上没有明显的拖尾,对称因子为1.36,平均塔板数为1443plates/m。在甲醇/水(10/90,v/v)流动相条件下,阿昔洛韦和其三种类似物在MIM1-HPLC柱达到基线分离,但NIM1-HPLC柱却不能分离这四种分析物,这结果进一步验证了使用AAD-DDA氢键阵列的定比计量非共价印迹法合成MIPs的优越性。此外,还将印迹微球与固相萃取联用(MISPE),探索出最佳条件后,利用MISPE分离富集血清中的阿昔洛韦。聚合物展示出良好的印迹效应,印迹因子为6.1。这种方法选择性好、灵敏度高,满足了人体血清样品中阿昔洛韦的检测,展示出良好的应用前景。
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