Klotho通过NLRP3炎症小体对脂多糖诱导巨噬细胞炎症反应的影响及机制初探

来源 :延边大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:z362523
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
背景:Klotho是一种抗衰老蛋白,还具有抗炎、抗肿瘤和抗氧化等功能。本实验室前期已证明Klotho可以通过抑制NF-κB的活性和氧化应激,抑制炎性介质的释放而调控巨噬细胞的浸润。NLRP3炎症小体作为NF-κB信号通路的下游蛋白,被认为是炎症反应的核心,异常激活时可以导致炎症反应的发生。研究证实Klotho可以有效地抑制疾病的炎症反应,但其抗炎作用机制是否与NLRP3炎症小体相关,目前尚无确切的报道。目的:旨在研究Klotho对脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞炎症反应的影响,并探究其抗炎机制是否与NLRP3小体相关。方法:1.将小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞复苏后,分成正常组和药物组,选择Klotho作为研究对象,浓度分别为(200、400、600、800 pm/L),培养24h后,采用MTT实验判断Klotho对RAW264.7细胞活力的影响。将小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞分为正常组(Normal)、LPS 组以及 LPS+Klotho(400 pm/L)组。随后,LPS(1μg/mL)诱导 RAW264.7细胞,建立起细胞炎性模型并给予药物处理。2.将 RAW264.7 细胞用 Klotho(400 pm/L)与 LPS 共同培养 12 h 后,RT-PCR 法检测 ASC、Caspase-1、NLRP3、TNF-α、IL-1β、IL-18 mRNA 的表达水平。3.将 RAW264.7 细胞用 Klotho(400 pm/L)和 LPS 共同培养 24 h 后,Western blot 检测细胞内 Phospho-NF-κB-p65、COX-2、ASC、Caspase-1、NLRP3、TNF-α、IL-1β、IL-18 的蛋白表达水平。4.将RAW264.7细胞用Klotho(400 pm/L)和LPS共同培养24 h后,收集细胞上清液,并用ELISA检测上清液中IL-1β、IL-18的含量。结果:1.MTT实验结果显示,Klotho浓度在200 pm/L-800 pm/L之间对RAW264.7细胞的生长和存活不产生影响,且在400 pm/L时细胞存活率最高,因此实验选用400 pm/L处理小鼠巨噬细胞。2.RT-PCR实验结果显示,与Normal组相比,经LPS处理后的RAW264.7细胞内ASC、Caspase-1、NLRP3、TNF-α、IL-1β,IL-18 mRNA 的表达上调(P<0.05);与 LPS 组相比,LPS+Klotho 组中 ASC、Caspase-1、NLRP3、TNF-α、IL-1β、IL-18 mRNA 表达则降低(P<0.05)。3.Western blot实验结果显示,与LPS组相比,LPS+Klotho组中COX-2的表达量降低,而且明显抑制了细胞内NF-κB-p65的磷酸化水平。此外,与Normal组相比,LPS组中ASC、Caspase-1、NLRP3、TNF-α及细胞因子IL-1β、IL-18的蛋白表达量增加;与LPS组相比,LPS+Klotho 组降低了 ASC、Caspase-1、NLRP3、TNF-α及细胞因子 IL-1β、IL-18 的蛋白表达水平。4.ELISA实验结果显示,与LPS组相比,LPS+Klotho组细胞培养上清液中促炎性因子IL-1β、IL-18的表达量下调。结论:Klotho在LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7的炎症反应中发挥了抗炎作用,其机制可能与抑制NLRP3炎症小体的活化有关。
其他文献
在国家大力推动“1+X”证书制度试点工作的背景下,课证融通是“1+X”证书制度试点工作落地的重要抓手。以柳州城市职业学院为例,探讨早期教育专业在幼儿照护“1+X”证书融入人才培养、核心课程建设、课程思政、教师团队建设等方面的改革路径和主要成效,以期为其他“1+X”证书的课证融通提供参考。
随着学生工作改革的不断深入,人才培养模式日趋多样化、学生工作管理服务需求多元化,学生社区思政育人逐渐成为新时代职业院校思想政治教育领域的重要课题。从职业院校学生社区思政育人的现实问题出发,以广东轻工职业技术学院学生社区育人经验为例,从学生社区思政育人机制、队伍平台、管理、技术等层面阐述职业院校学生社区思政育人路径。
文中设计并实际开发了一种基于砷化镓(Gallium Arsenide, GaAs)集成无源器件(Integrated Passive Device, IPD)技术的小型化高选择性宽带带通滤波器。首先,所提出的带通滤波器是通过引入集总参数谐振器来设计的,以实现高选择性和宽带性能。其次,进一步研究了实现高选择性和宽带性能的工作原理。最后,为了证明所述性能,基于GaAs-IPD技术设计、制造和测量了一个
研究目的:足球运动影响力广泛,产业规模可观,是促进现代城市发展的重要方式之一。广州足球在发展中形成了鲜明特色和宝贵经验,具有示范效应和借鉴价值。研究方法:赴广州市、清远市实地调研,对广州市人民政府副市长王东、广州市体育局副局长李志强、恒大淘宝足球俱乐部董事长李一萌,以及恒大足球学校、广州民间足球组织负责人进行深度访谈,对当地足球运动参与人群、足球场地、足球赛事等进行实地考察。此外,还运用文献资料法
随着社会的发展和进步,教育在人们心目中的地位也与日俱增。小学阶段正是学生学习习惯和“三观”养成的关键时期,对学生未来的发展有着重要的影响,而在传统应试教育思想影响下“填鸭式”教学模式,很难对学生的全面发展起到推动作用。因此,新课改背景下,小学语文的课堂中,教师一改传统教学模式,将单元教学作为课堂的中心,以提高学生的学习积极性,提升语文课堂的教学效率,促进学生的身心健康发展。
基于实验研究、热力学计算与动力学分析,研究了Ni含量对Co-Al-W基单晶高温合金凝固特性的影响。结果表明:无Ni和添加Ni的Co基单晶高温合金均具有典型的枝晶组织,但Ni的添加增大了合金的一次枝晶间距。同时,Ni的添加增大了Al和W元素的显微偏析倾向,降低了Ta元素的显微偏析倾向,但对Ti元素的显微偏析倾向的影响较小。无Ni合金的枝晶间析出相为初生γ′相和(β+γ′)共晶相,而含Ni合金的枝晶间
“十四五”期间,广东省“双区”建设是全省发展改革工作的总纲,这对科技创新能力、提出现代产业体系新的要求和挑战。高职院校应紧抓机遇,因地制宜地进行产教融合,建设一支能够培养高技能人才的“双师型”师资队伍,以期为战略性新兴产业提供人才储备。目前,“双师型”教师队伍建设存在教师招聘条件的限制、培养体系不够健全、评价激励机制不够完善等问题,基于此,高职院校应加强“双师型”人才引进力度、拓宽“双师型”人才引
目的思维导图(mind map)又叫心智图,利用一个中央关键词以辐射线的形式连接所有的代表字词、想法、任务或其他关联的项目,是一种表达思维路线的有效图形思维工具。运用"思维导图"指导教学活动,可以使学生对知识点条理清晰、分类明确,有助于学生对知识点形成更加形象、更加准确、更加深刻的记忆。我科室将思维导图法运用到急诊实习的临床教学中,以期提高学生快速进行病情识别,锻炼临床急救思维能力,知晓进一步的处
<正>吟诗《琵琶行》,品茗“浮梁红”,华夏出行有限公司董事长萧枭开启了与笔者的茶叙。他曾承担大型中外合资车企的财务管理工作,使彼时处于探索期的合资企业成功走出了一条适合自身发展的财务体系建设路径;如今把舵京城市属最大国企北汽集团旗下的华夏出行业务,运筹于互联网和汽车交织的出行行业。无论在哪个岗位上,与萧枭一路同行的都是盛满书柜的典籍,他的办公桌上总是摆放着稻盛和夫的《经营哲学》,这本书似乎映射着萧
期刊