论文部分内容阅读
河蚬是一种高产的经济贝类,其味道鲜美、营养丰富,具有很大的开发利用潜力。目前国内外学者对河蚬的研究主要集中于河蚬多糖和河蚬糖蛋白,对河蚬生物活性多肽的研究很少。本文重点对河蚬多肽提取、分离纯化及抗氧化活性进行研究。主要研究内容和结果如下:1.酶法制备河蚬多肽的工艺优化以河蚬为原料,DPPH清除率为响应值,通过对比发现胰蛋白酶的酶解效果最好。以胰蛋白酶为酶制剂进行酶解试验,在单因素试验的前提下通过响应曲面试验优化工艺参数。优化后的工艺参数为:当加酶量1600U/g, pH值8.0,酶解温度38.8℃C,酶解时间6.5h。在此条件下,DPPH清除率达到最大值,为43.25±0.17%。2.超滤分离河蚬多肽抗氧化活性及稳定性研究对制备的河蚬多肽进行超滤分离,比较发现低分子量(<3KD)的河蚬多肽具有较强的抗氧化活性。对低分子量河蚬多肽的活性稳定性研究发现:①温度对低分子量河蚬多肽活性影响较小;②反复冻融对低分子量河蚬多肽活性影响较小;③碱性条件对多肽生物活性的影响较大;④低分子量河蚬多肽活性受重金属离子(Cu2+、Zn2+)影响较大,重金属离子不利于低分子量河蚬多肽活性保持。3.低分子量河蚬多肽分离纯化低分子量河蚬多肽经Sephadex G-15柱洗脱共得到6个峰。试验发现峰4(CFPs-4)的各项ICso值均最小,其活性最强,对应的DPPH清除率为0.45mg/mL,羟自由基清除率为0.25mg/mL。继续使用DA201-C型大孔树脂进行分离纯化,从低分子量河蚬多肽分离组峰4(CFPs-4)中分离出的3个峰,最终发现峰3的抗氧化活性最强,对应的DPPH清除率为0.36mg/mL,羟自由基清除率为0.23mg/mL。4.低分子量河蚬多肽对急性化学性肝损伤的保护效果将低分子量河蚬多肽应用到CCL4构建的化学性肝损伤小鼠模型中。摄入活性多肽对小鼠的体重几乎无影响,适量的活性多肽摄入能够明显降低小鼠的肝体比,提高小鼠的脾体比。高剂量的低分子量河蚬多肽对小鼠血清中的AST、ALT酶、肝脏中SOD、GSH-Px酶活性保持均具有显著效果,同时能够有效降低肝脏中MDA的生成,以达到保护肝脏的作用。