普通小麦TaZIP29-7B基因的克隆及功能研究

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金属离子在小麦生长过程中起重要作用,如果土壤中含量过高,则会对小麦生长造成损害。锌铁是植物生长过程中所必须的营养元素,锌参与多种代谢,稳定生物膜机能并且能够调控基因表达,适量增加或促进锌的吸收能够提升作物产量和品质;铁在细胞呼吸和光合作用中起到重要的作用,是重要的电子传递体,锌或铁过量会导致植物细胞损伤,影响植株的正常生长。锌铁转运蛋白ZIP家族(ZRT,IRT-like protein,ZIP)广泛存在于植物中,参与多种金属离子的转运。本研究利用同源克隆在小麦中克隆了TaZIP29-7B基因,获得了其启动子序列,对所获得的基因以及启动子进行生物信息学分析,利用qRT-PCR方法分析了TaZIP29-7B基因在不同金属离子溶液处理下根和叶中的表达,获得的主要结果如下:1.TaZIP29-7B基因(登录号:MK203894)编码277个氨基酸,第89-263位置间的结构功能域ZIP,属于典型的ZIP超级家族结构域,TaZIP29-7B蛋白为疏水性蛋白,定位在细胞膜上,具有8个跨膜区,存在信号肽,属于分泌蛋白;进化分析显示TaZIP29-7B与山羊草(Aegilops tauschii)ZIP29蛋白同源性最高;启动子中存在多种响应胁迫的顺式作用元件,如响应ABA应答元件ABRE、响应赤霉素作用元件TATC-box以及MeJA作用元件TGACG-motif等。2.TaZIP29-7B基因在小麦根部和叶片中的表达量没有显著差异。在根中,TaZIP29-7B基因对锌盐反应非常迅速,响应铁盐的速率较慢,表达量呈现先升高再降低的变化;TaZIP29-7B基因对镉盐以及铜盐的处理后迅速升高直到6h后再降低,随后在24h再次升高,表达模式与锌处理不同。3.TaZIP29-7B基因拟南芥遗传转化结果显示,在无抗生素及重金属离子的MS培养基中,转基因植株的生长情况与野生型基本一致,根长差异不显著;在重金属处理下,转基因植株根系的生长受到一定的抑制,转基因植株的根系长度比野生型的长,有显著差异。
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