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产肠毒素性大肠杆菌（Enterotoxigenic Escherichia coli.,ETEC）是一类引起人和幼畜（初生仔猪、犊牛、羔羊）腹泻的重要病原菌,初生幼畜被ETEC感染后,常因剧烈水样腹泻和迅速脱水而死亡,发病率和死亡率均很高,给养殖业带来严重的经济损失。目前,通过在饲料中添加抗生素进行防治是一条最主要的途径。但近些年来,抗生素的由于耐药性、安全性等问题遭到了广泛的置疑和反对,世界上很多国家都对饲料中添加抗生素实行了禁用或限用。益生素（Probiotics）由于“无毒”、“无抗药性”、“无残留”、“无副作用”的特点,逐渐成为国内外饲料添加剂研究的热点。本文利用绿色荧光蛋白（Green fluorescent protein）标记技术研究ETEC致病特性及筛选益生菌在体内、体外进行抑制致病菌研究,主要结果如下:1.通过电击转化法,将带有gfp标记基因的pGLO质粒成功转化到产肠毒素性大肠杆菌K88中,经过紫外检测及荧光显微镜检测均发现标记菌株发出绿色荧光。进一步通过分子鉴定、脂肪酸分析、血清学鉴定发现标记菌株和原始菌株没有差异。同时研究在不同微生物学培养条件如:温度、pH值、盐浓度培养条件下,标记菌株的生长状态和原始菌株一致。2.建立小白鼠K88、K88-GFP攻毒模型,K88的LD50为5.53×108 CFU/mL,K88-GFP的LD50为4.86×108 CFU/mL。同时利用标记菌株自发荧光的特点研究感染K88-GFP小白鼠的各器官致病菌的定植情况,发现在肝、肾中细菌最多,同时在脑、肌肉中也有少量分布。并且分析感染K88的小白鼠的血液成分、血生化指标的变化。K88对白细胞及相关指标的影响较大,WBC、W-SCC、W-LCC显著降低;对红细胞及相关指标的影响较小,仅在6h RBC、HCT、HGB降低;对血小板也有影响,PLT显著下降,MPV有所升高。K88对血液生化指标中反应肝、肾功能的指标影响较大,ALT、AST和BUN、UA显著升高,而对反应脂代谢的指标无影响,TCHO、TG与对照组相比无差异。3.从土壤中筛选到的一株芽孢杆菌对K88、鸡大肠杆菌、沙门氏菌有抑制作用,通过对其表型特征、生理生化特征、脂肪酸分析和16S rDNA序列分析的多相分类研究,初步确定该菌株为短芽孢杆菌（Brevibacillus brevis）。