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背景和目的:越来越多的证据显示,天然化合物姜黄素(curcumin)在肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭和转移中起着至关重要的作用,并参与调节多种细胞信号传导途径。大量研究已证实,mi RNA能够负向调控靶基因的表达,在肿瘤发生发展中发挥着抑癌基因和癌基因的功能。在本项研究中,我们将探讨姜黄素作用胰腺癌细胞后,对其生长、迁移和侵袭影响的作用和可能的分子机制。方法:1.以人胰腺癌As PC-1和Bx PC-3细胞为试验对象,分别采用MTT增殖,Transwell试验,Annexin V-FITC/PI双染等试验检测姜黄素抑制细胞的增殖、迁移侵袭及诱导细胞凋亡的作用。2.应用实时定量PCR法检测姜黄素对两株细胞中mi R-7表达的影响。3.通过转染mi R-7 mimics上调细胞内mi R-7的表达,或者转染mi R-7inhibitor下调细胞内mi R-7表达,并结合姜黄素处理细胞,检测姜黄素通过上调mi R-7抑制胰腺癌细胞的增殖、侵袭和诱导凋亡的作用。其中上调mi R-7的实验分组分别为对照组、姜黄素处理组、mi R-7 mimics转染组、姜黄素与mi R-7 mimics两者共同处理组。下调mi R-7表达的实验分组分别为:对照组、姜黄素处理组、mi R-7 inhibitor转染组、姜黄素与mi R-7 inhibitor共同处理组。4.通过转染mi R-7mimics以及mi R-7 inhibitor,结合姜黄素处理细胞,实验分组同上,检测姜黄素通过上调mi R-7影响细胞内下游靶蛋白SET8的表达。结果:1.不同浓度姜黄素分别作用人胰腺癌As PC-1和Bx PC-3细胞后,与对照组相比,细胞增殖、迁移和侵袭能力明显降低(P<0.05),且呈现浓度依赖性。提示姜黄素能够抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。2.不同浓度姜黄素分别作用人胰腺癌As PC-1和Bx PC-3细胞后,细胞凋亡率明显高于对照组,呈现剂量依赖关系,说明姜黄素具有诱导胰腺癌细胞凋亡的作用。3.姜黄素作用胰腺癌细胞48小时后,q RT-PCR结果表明,姜黄素处理组细胞内mi R-7表达明显高于对照组(P<0.05),并呈现浓度依赖关系提示姜黄素具有上调胰腺癌细胞中mi R-7表达的作用。4.上调mi R-7表达的实验分组结果显示:与对照组相比,姜黄素处理组和mi R-7mimics转染组均能抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭,诱导凋亡,且两者共同处理组效果更加明显(P<0.05)。同样,下调mi R-7表达的实验分组结果显示:与对照组相比,mi R-7 inhibitor转染组促进了胰腺癌细胞增殖和侵袭能力,并且抑制凋亡,两者共同处理组结果介于姜黄素组和mi R-7 inhibitor组之间。以上结果说明了姜黄素通过上调mi R-7的表达抑制胰腺癌细胞增殖和侵袭能力,促进细胞的凋亡。5.上调mi R-7表达的实验分组结果显示:与对照组相比,姜黄素处理组和mi R-7mimics转染组均下调了胰腺癌细胞内mi R-7下游靶蛋白SET8的表达,且两者共同处理组效果更加显著。同样,下调mi R-7表达的实验分组结果显示:mi R-7inhibitor转染组则上调了胰腺癌细胞内SET8蛋白的表达,姜黄素处理组下调了SET8蛋白的表达,两者共同处理组则介于两者之间。以上结果说明姜黄素通过上调胰腺癌细胞中mi R-7的表达下调SET8蛋白的表达。结论:1.姜黄素能够抑制人胰腺癌As PC-1和Bx PC-3细胞增殖、迁移和侵袭能力,促进细胞凋亡。2.姜黄素能够通过上调mi R-7的表达抑制人胰腺癌As PC-1和Bx PC-3细胞增殖和侵袭能力,促进细胞凋亡,并下调下游靶蛋白SET8的表达。