海带渣的酶解工艺优化及在对虾养殖中的应用

来源 :上海海洋大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:Evilkonata
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海带渣是工业提胶的剩余产品,经过筛选、除杂、粉碎、混合,采用低温干燥、超微粉碎加工制成;为具有海带特殊腥味的褐色或浅绿色的粉末。近年来,海带加工业迅速发展,导致剩余的加工废弃物数量也在不断增加,不但造成大量的资源浪费,而且会造成环境污染。所以,海带渣的高值化利用是迫切需要解决的问题。本研究初步探讨了海带渣的酶解工艺及其在对虾养殖中的应用。主要探讨了⑴海带渣的酶解工艺;⑵饲料中添加海带渣对凡纳滨对虾生长、消化酶和非特异性免疫酶的影响;⑶饲料中添加海带渣的酶解产物对凡纳滨对虾生长、消化酶和非特异性免疫酶的影响;⑷添加海带渣对凡纳滨对虾养殖水质及对虾非特异性免疫酶的影响;主要内容如下:1、海带渣的酶解工艺优化;研究采用正交试验设计,以还原糖和氨基酸的产出量分别作为两种酶酶解效率的评价指标,研究β-葡聚糖酶和蛋白酶的添加量、酶解温度、酸碱度对海带渣酶解效率的影响,以优化海带渣的酶解条件。1)利用β-葡聚糖酶酶解海带渣中纤维等多糖类物质的最佳条件为:β-葡聚糖酶添加量300 U/g,酸碱度为4.4,酶解温度50℃,酶解海带渣生成还原糖的效率为8.96%;2)利用中性蛋白酶酶解海带渣中的蛋白质的最佳条件为:蛋白酶添加量1000 U/g,反应温度为45℃,酸碱度为6.0,酶解海带渣生成氨基酸的效率为11.3%。2、饲料中添加海带渣对凡纳滨对虾生长、消化酶和非特异性免疫酶的影响;研究采用单因素实验设计,通过配制6种海带渣添加量分别为0、0.5%、1%、2%、3%、5%的饲料(分别记为D1~D6组)饲养初始体重(1.00±0.10)g的对虾49天后检测并分析对虾生产性能和血淋巴中消化酶、免疫酶活性,结果显示:D4、D5组凡纳滨对虾的特定生长率(specific growth rate,SGR)、增重率(weight gain rate,WGR)显著高于对照组(P<0.05),D5组饲料系数(feed conversion ratio,FCR)显著低于对照组(P<0.05);随着海带渣含量的增加胃蛋白酶(pepsin,PP)、酚氧化酶(polyphenol oxidase,PO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性呈现先升高后下降的趋势,且3%海带渣添加组的对虾酶活性显著高于未添加组(P<0.05);由此可得,凡纳滨对虾饲料中海带渣适宜添加量为3%;3、饲料中添加海带渣酶解产物对凡纳滨对虾生长、消化酶和非特异性免疫酶的影响;根据第二部分的实验结果,以3%添加含量作为对照组(记为A组),β-葡聚糖酶酶解(β-glucanase treatment,GT)、蛋白酶酶解(protease treatment,PT)2种方法处理的海带渣作为实验组(分别记为B、C组)饲养初始体重(1.00±0.10)g的对虾56天试验结束后检测对虾养殖性能和相关酶活性。结果发现:两种酶解方法处理的海带渣中,GT海带渣能显著提高对虾WGR、SGR,并能显著降低对虾FCR(P<0.05),PT处理海带渣可显著提高对虾成活率(survival rate,SR)(P<0.05);GT和PT处理海带渣组PO、酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)、胃纤维素酶(cellulase,CL)活性比未处理A组显著提高(P<0.05);所以,饲料中添加β-葡聚糖酶酶解的海带渣能显著影响凡纳滨对虾生长性能和免疫力,而添加蛋白酶酶解海带渣显著提高对虾免疫力。4、添加海带渣对凡纳滨对虾养殖水质及对虾非特异性免疫酶的影响;实验通过比较添加海带渣组和对照组的水质指标、水体细菌含量和对虾非特异性免疫酶的变化,分析水体中添加海带渣的效果。结果表明:添加海带渣组的氨氮浓度在中后期的最大浓度为1.74 mg/L显著低于对照组的最高值5.64 mg/L,然后开始下降,后期添加组总氨氮浓度为0.22 mg/L,对照组总氨氮浓度为0.44mg/L。养殖结束时,对照组亚硝态氮浓度达到最大值为9.85 mg/L略高于添加组浓度的最大值8.91 mg/L,对照组和实验组硝态氮浓度分别为0.32 mg/L和13.2 mg/L。在实验的中后期,实验组中异养菌的数量达到2.86×106~3.50×106 CFU/m L显著超过对照组4.50×105~1.13×106 CFU/mL,说明添加海带渣有利于对虾养殖水体中微生物的生长。实验结束后,对凡纳滨对虾取样并进行相关免疫指标测定结果表明:养殖水体中添加海带渣对虾酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)、溶菌酶(lysozyme,LZM)、过氧化物酶(peroxidase,POD)活性显著提高(P<0.05);综上所述,在凡纳滨对虾养殖水体中添加海带渣,能有效促进氨氮、亚硝态氮转化为硝态氮,有益于异养菌的繁殖和生长,提高对虾免疫力。
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