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第一部分:复方苦参汤通过自噬途径抑制铁死亡改善溃疡性结肠炎目的:研究复方苦参汤通过激活自噬途径抑制铁死亡从而缓解溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）小鼠的作用机制。方法:C57/B6小鼠自由饮用3%的DSS,连续7天,构建小鼠UC模型。首先将所有的小鼠适应性喂养7天,实验正式开始,将小鼠随机分为五个组,对照组、模型组、铁死亡抑制剂组、铁死亡激动剂组和复方苦参汤组。除对照组及铁死亡激动剂组继续给予蒸馏水饮用外,其余三组每日给予3%DSS自由饮用,铁死亡抑制剂组同时每天给予Fer-1（一种铁死亡抑制剂）腹腔注射一次,连续7天,复方苦参汤组每天给予复方苦参汤水煎剂灌胃,铁死亡激动剂组在第6天和第7天分别给予Erastin（一种铁死亡激动剂）腹腔注射,两次注射间隔12小时。实验期间每日记录观察小鼠的体重、精神状态、大便情况等,以此判断疾病活动状况。第8天眼球取血后处死小鼠,留取小鼠的结肠样本进行后续的各项检测,如各组小鼠的病理学评分;免疫组化检测凋亡;ELISA和qRT-PCR检测炎症指标;Western blot检测肠道组织中铁死亡的标志物和自噬的标志物以及组织铁检测铁离子的积累;免疫荧光检测紧密连接蛋白ZO-1和Occludin。实验的第二部分,重新设置四组,包括对照组、模型组、3-MA（一种自噬抑制剂）和复方苦参汤组。对照组给予蒸馏水自由饮用,其余三组均给予3%DSS自由饮用构建UC模型,3-MA组及复方苦参汤每日均给予复方苦参汤水煎剂灌胃,3-MA组每日另给予3-MA腹腔注射一次,连续7天。第8天同样采取眼球采血以及留取结肠。Western blot检测自噬相关蛋白以及AMPK、ULK1和mTOR蛋白;透射电镜检测自噬溶酶体的形态;免疫组化检测黏液分泌蛋白MUC2的表达和分布。结果:1、复方苦参汤能够减轻UC小鼠的体重下降,能够降低DAI评分,改善肠道病理。2、复方苦参汤能够缓解UC小鼠的炎症反应和凋亡。3、铁死亡相关标志物PTGS2和GPX4的结果可以被复方苦参汤所调节。4、复方苦参汤能够上调自噬相关基因的表达。5、复方苦参汤能够上调AMPK/ULK1通路,下调AMPK/mTOR通路。6、复方苦参汤能够增加紧密连接蛋白ZO-1、Occludin以及黏液分泌蛋白MUC2的表达和分布。差异具有统计学意义（p＜0.05）。结论:复方苦参汤能够通过调节AMPK/ULK 1/mTOR通路激活自噬,从而抑制铁死亡达到治疗UC的目的。第二部分:EphB2-BMSC-Exo调节溃疡性结肠炎T细胞分化目的:研究过表达EphB2的BMSC-Exo调节UC肠屏障功能的机制以及对T细胞分化的影响。方法:取一只体重80-100g的雄性SD大鼠,取其胫骨和腓骨,剔除皮肉后,剪开两端的骨骺,用5mL注射器反复冲洗骨髓腔获得骨髓进行培养。48小时后首次换液,贴壁生长的即为 BMSCs（Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）,随后每隔3天换液一次,当细胞铺满培养瓶80-90%时,进行传代,当培养到P2代时,将编码EphB2的慢病毒载体转染到BMSCs中,并用嘌呤霉素筛选出稳定过表达EphB2的BMSCs。药筛后的BMSCs继续培养,当培养到P4-P5代时,用不含血清的培养基饥饿48小时后,从细胞的培养上清液中通过超速差速离心法分离出过表达EphB2的胞外囊泡（Exosome derived from Bone marrow mesenchymal stem cells,EphB2-BMSC-Exo）。用 3%DSS 构建 Caco-2 的炎症模型,随后与 EphB2-BMSC-Exo共培养,通过CCK-8、划痕实验检测EphB2-BMSC-Exo对Caco-2细胞增殖和迁移的影响;ELISA检测EphB2-BMSC-Exo对炎症反应的影响;FITC-4000检测EphB2-BMSC-Exo对Caco-2细胞单层通透性的影响;Western blot检测EphB2-BMSC-Exo对RhoA-ROCK信号通路的影响。同时用过氧化氢构建Caco-2的氧化损伤模型,探究EphB2-BMSC-Exo对氧化应激的调节作用。此外,取一只体重60-80g的雄性SD大鼠,处死后开腹取其脾脏,将脾脏剪碎,通过70μm筛网研磨过滤后,离心获得小鼠脾脏淋巴细胞。随后通过磁珠分选获得大鼠脾脏CD4+T淋巴细胞,加入各种细胞因子刺激CD4+T淋巴细胞向T细胞亚群分化的同时,加入EphB2-BMSC-Exo共培养,72h后通过流式细胞术对各T细胞亚群进行检测,探讨EphB2-BMSC-Exo对T细胞分化的影响。结果:1、成功构建过表达EphB2的慢病毒,并成功转染到BMSCs中,获得稳定表达 EphB2 的 BMSCs,成功提取出 EphB2-BMSC-Exo。2、EphB2-BMSC-Exo 能够保护Caco-2细胞被DSS抑制的细胞活性、促进细胞增殖和迁移。3、EphB2-BMSC-Exo可以减轻Caco-2细胞的炎症反应,并增加抗氧化酶的活性,同时抑制Caco-2细胞的氧化应激。4、EphB2-BMSC-Exo通过抑制RhoA/ROCK通路恢复肠道屏障功能。5、磁珠分选成功获得大鼠脾脏的CD4+T淋巴细胞,并成功培养72h,EphB2-BMSC-Exo能够促进CD4+T淋巴细胞向Treg细胞分化,抑制其向Th1和Th17细胞分化。差异具有统计学意义（p＜0.05）。结论:EphB2-BMSC-Exo在体外通过抑制RhoA/ROCK通路增强肠道屏障功能,并且能够调节免疫平衡。实验表明EphB2-BMSC-Exo可能作为一种新型的治疗UC或其他免疫性疾病的无细胞疗法。