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目的研究造血系统肿瘤骨髓增生异常综合征(myelodys-plastic syndrome,MDS)、急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)和慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者中粘着斑激酶相关性鸟苷三磷酸酶调节因子(GTPase regulator associated with the focal adhesion kinase,GRAF)基因启动子区域的甲基化状况,并分析其临床相关性。方法建立并应用甲基化特异性PCR(methylation-specificPCR,MSP)技术对68例MDS患者、132例AML患者、61例CML患者及20例对照组骨髓单个核细胞标本的GRAF基因启动子甲基化状态进行检测；建立EvaGre en染料法实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,RQ-PCR),对71例AML患者和21例良性血液病患者中GRAF转录本水平进行检测。结果20例对照组均未发生GRAF基因启动子甲基化,但在血液系统肿瘤患者中均有不同程度的GRAF基因甲基化：①68例MDS患者中28例(41.2%)发生了GRAF基因甲基化,GRAF基因甲基化改变与MDS患者的性别、年龄、血象、染色体异常等结果均无相关性(P>0.05)；GRAF基因甲基化频率在难治性贫血／伴有环形铁粒幼细胞的难治性贫血(refractory anemia/refractory anemia with ringed sideroblasts,RA/RAS)(2/5例,40%)、伴多系病态造血的难治性血细胞减少症(refractory cytopenia with multilineage dysplasia,RCMD)和伴环形铁粒幼细胞的RCMD(refractorycytopenia with multilineage dysplasia with ringed blasts, RCMD-RS)(8/21例,38.1%)、难治性贫血伴有原始细胞增多-1型(refractory anemia with excess blasts-1, RAEB-1)(5/14例,35.7%)、难治性贫血伴原始细胞增多-2型(refractory anemia with excess blasts-2, RAEB-2)(7/14例,50.0%)、单纯5q-综合征(1/3例,33.3%)、MDS-U(2/3例,66.7%)和难治性贫血伴有原始细胞增多转化型／急性髓系白血病(RAEBt/AML)(3/8例,37.5%)之间的差异无统计学意义(P>0.05)；GRAF基因甲基化频率与患者的FAB分型、IPSS分组和WHO分型均无相关性(P>0.05)；Cox回归分析揭示GRAF基因甲基化、年龄、外周血白细胞计数、IPSS分组对患者的生存具有显著的影响(P值分别为0.017,0.001,0.001和<0.001),而性别、血红蛋白含量、血小板计数并无影响(P>0.05)。甲基化阳性组与阴性组预计50%生存时间分别为12个月和26个月,两组之间有显著差异(x2=7.942,P=0.005)。②132例AML患者中87例(65.9%)发生GRAF基因甲基化,GRAF基因甲基化改变与患者的性别、年龄、白细胞、血红蛋白、血小板计数、染色体异常等结果均无相关性(P>0.05)；AML各亚型中GRAF基因甲基化频率分别为63.0%(17/27例,M1)、57.1%(24/42例,M2)、72.2%(13/18例,M3)、84.0%(21/25例,M4)、46.2%(6/13例,M5)、85.7%(6/7例,M6),AML各分型之间GRAF甲基化频率差异有统计学意义(x2=11.143,P=0.049),在急性粒单核细胞白血病(M4)和急性红白血病(M6)中甲基化频率明显高于其他亚型；AML患者中GRAF转录本水平(0.01%～169.75%,中位3.82%)较对照组(14.49%～126.85%,中位56.04%)显著降低(P<0.05),其中甲基化阳性组GRAF转录本水平较甲基化阴性组显著降低(P=0.005),GRAF基因表达量与患者性别、年龄、外周血白细胞计数、血红蛋白含量、血小板计数、FAB亚型、染色体核型分组均无相关性(P＞0.05)。③61例CML患者中34例(55.7%)发生GRAF基因甲基化,GRAF基因甲基化改变与患者的年龄、性别、血红蛋白含量、白细胞计数、血小板计数、染色体异常类型等结果均无相关性(P>0.05)；GRAF基因甲基化频率在CML各分期分别为慢性期(CP)55.3%(21/38例)、加速期(AP)50.0%(2/4例)、急变期(BC)57.9%(11/19例),GRAF启动子甲基化频率与CML分期之间的差异无统计学意义(P＞0.05)。结论GRAF基因甲基化可能是促进造血系统髓系肿瘤MDS、AML和CML发生发展的分子事件之一；GRAF基因甲基化是MDS的一个不良预后因素。