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辅助生殖技术(ART)是临床治疗不孕不育最有效的手段，自1978年英国诞生首例试管婴儿以来，已有超过500万婴儿借助ART出生。流行病学统计发现:ART人群出现Beckwith-Wiedemann(BW)、Russell-Silver(RS)和Angelman(AS)综合征等表观遗传疾病的比例远高于正常生育的后代。目前认为ART造成后代中重要印记基因的改变，是导致表观遗传疾病的主要原因;揭示这一现象的分子机理和找到分子靶位点是进一步完善ART的重要内容。在本实验室的前期研究中，发现:ART可致胚胎中印记基因Plagl1发生印迹紊乱;JUP蛋白分子在这一过程中起到重要的调控作用。本论文聚焦于JUP蛋白分子和印记基因Plagl1，旨在揭示ART致印记基因印迹异常的发生机制。以小鼠为动物模型，发现:1）体外受精(In vitro fertilization，IVF)可导致E18.5天小鼠胎儿心脏中印记基因Plagl1的印迹丢失，但对E9.5天小鼠胎儿中印记基因Plagl1的印迹没有显著影响;2）IVF导致E9.5天小鼠胎盘中印记基因Plagl1的DNA甲基化水平升高以及Plagl1，Dlk1，Igf2等印记基因表达水平下调;到E18.5天时，IVF小鼠胎盘中的Plagl1，Dlk1，Igf2等印记基因的表达水平都得到一定程度的修复，但IVF小鼠胎盘中仍然存在印记基因Plagl1印迹丢失的现象;3）IVF胎儿与胎盘中印记基因Plagl1的印迹异常可追溯到植入前胚胎，表现为早期胚胎中印记基因Plagl1的印迹丢失;4）在E9.5天IVF小鼠胎盘中，调控蛋白JUP表达下调伴随着印记基因Plagl1的DNA甲基化水平升高及TET1表达紊乱;5）IVF影响JUP在植入前胚胎中的表达和定位;6）在体内受精的受精卵原核期敲降JUP可导致囊胚期印记基因Plagl1的DNA甲基化水平升高，对印记基因H19和Snprn的DNA甲基化水平也有轻微影响;7）植入前胚胎中敲降JUP导致E18.5天小鼠心脏中印记基因Plagl1的印迹丢失;8）Jup表达异常会引起DNMTs家族基因的表达水平异常。 综上所述，我们的结果表明，IVF可导致胚胎中Jup表达异常，引起DNMTs家族及TETs家族基因的表达水平异常;进而致印记基因Plagl1的DNA甲基化水平异常以及胎盘中印记基因Plagl1及其他印记基因的表达紊乱，并影响妊娠期胎儿的基因印迹，从而增加了后代患印记基因相关疾病的风险。