【摘 要】
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目的在先后两次卡介苗(BCG)免疫Balb/c小鼠后,检测抗PPD抗体IgG、抗PPD抗体IgM以及CD4+记忆T细胞,以探索其变化发展趋势,为临床诊断结核病以及研究BCG相关的免疫记忆提供实验
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目的在先后两次卡介苗(BCG)免疫Balb/c小鼠后,检测抗PPD抗体IgG、抗PPD抗体IgM以及CD4+记忆T细胞,以探索其变化发展趋势,为临床诊断结核病以及研究BCG相关的免疫记忆提供实验数据。方法1、将35只雌性Balb/c小鼠,随机分为对照组(注射生理盐水)5只,处理组(皮下注射BCG)30只,其中处理组分为初次免疫组(15只)和再次免疫组(15只)。2、通过间接ELISA法,检测血清中抗PPD抗体IgG、IgM。3、通过免疫组化方法,检测肺和脾脏组织中CD4+记忆T细胞CD3、CD4、CD44、CD62L 的表达。结果1、在初次免疫后第50天,BCG免疫组与对照组抗PPD抗体IgG的OD值均数,其差异具有统计学意义。第60天进行再次免疫,在第65天,BCG免疫组与对照组抗PPD抗体IgG的OD值均数,其差异具有统计学意义。而在整个免疫过程中,初次免疫和再次免疫,BCG免疫组与对照组抗PPD抗体IgM的OD值均数,其差异均无统计学意义。2、肺部切片经免疫组化染色后,可见CD3、CD4、CD44、CD62L阳性细胞主要集中分布于细支气管附近。2.1、各组肺中CD3的免疫组化累积光密度值(IOD)无显著变化(P>0.05)。2.2、各组肺中CD4的IOD值:初次免疫组、再次免疫组均显著高于对照组(P<0.05)。2.3、各组肺中CD44的IOD值:初次免疫组、再次免疫组显著高于对照组(P<0.05),再次免疫组显著高于初次免疫组(P<0.05)。2.4、各组肺中CD62L的IOD值:初次免疫组、再次免疫组均显著高于对照组(P<0.05),再次免疫组显著高于初次免疫组(P<0.05)。3、脾脏切片经免疫组化染色后,可见CD3、CD4、CD44、CD62L阳性细胞主要集中分布于白髓。3.1、各组脾脏中CD3的IOD值:再次免疫组显著高于对照组、初次免疫组(P<0.05)。3.2、各组脾脏中CD4的IOD值无显著变化(P>0.05)。3.3、各组脾脏中CD44的IOD值:初次免疫组、再次免疫组显著高于对照组(P<0.05),再次免疫组显著高于初次免疫组(P<0.05)。3.4、各组脾脏中CD62L的IOD值:再次免疫组均显著高于对照组、初次免疫组(P<0.05)。4、在初次免疫组中,脾脏中CD3、CD4、CD62L的IOD值显著高于肺部(P<0.05)。5、在再次免疫组中,脾脏中CD3、CD4、CD44、CD62L的IOD值显著高于肺部(P<0.05)。结论1、BCG初次免疫Balb/c小鼠后,抗PPD抗体IgG整体呈上升趋势,再次免疫后,可在短期内迅速增多,并在很长一段时间内都维持在一个较高水平。抗PPD抗体IgM无显著变化。2、通过BCG的初次免疫和再次免疫后,小鼠肺部和脾脏中总的CD4+记忆T细胞以及CD4+TCM均有增多,并且脾脏中总的CD4+记忆T细胞以及CD4+TCM均要多于肺部。
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