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肝脏是机体的重要器官，承担着物质代谢和生物转化的功能，血液供应丰富，因此易受到体内外各种致病因素和刺激因子的侵袭，引起肝脏的损伤与炎症反应。肝损伤是由各种肝脏疾病所产生的病变结果。临床上造成急性肝损伤的原因主要有药物服用不当、饮酒过量、误食有毒食物、病毒感染等。肝损伤的发生机制颇为复杂，可分为化学性和免疫性。化学机制主要通过CYP2E1及结合反应产生的中间代谢产物产生损伤，如使线粒体功能失调、改变质膜的完整性、细胞内离子浓度的变化以及自由基作用等；免疫机制则通过细胞因子、一氧化碳、补体及免疫变态反应等产生损伤、病理性细胞凋亡也是其中之一。肝脏长期处于损伤状态，往往会导致肝纤维化的发生。肝纤维化是肝脏对不同病因所致的慢性损害产生的创伤愈合反应，表现为细胞外基质（extracellularmatrix，ECM）成分的过度增生与异常沉积、肝星状细胞（hepatic stellate cell，HSC）过度增殖。肝纤维化是多种慢性肝病向肝硬化发展的中间病理阶段。有研究表明，肝纤维化病变经积极治疗可延缓甚至逆转。目前，各国学者从肝纤维化发生发展的不同环节入手，研制了许多抗纤维化药物，但因种种原因尚未找到十分理想的药物。因此，深入了解肝纤维化分子作用机制，寻找理想的的抗纤维化药物及有关肝纤维化发病机制的阐明，具有重要的理论和临床意义。夏枯草为唇形科夏枯草属植物，性味苦寒，是一种传统的中药，具有抗炎、抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等生物活性。其含有多种活性化学成分，主要有三萜类、甾体类、黄酮类、香豆素类等化合物。本实验通过建立化学性急性肝损伤以及肝纤维化动物模型，探讨夏枯草总三萜（total triterpenoid of Prunella vulgaris L., TTP）抗大鼠急性肝损伤及肝纤维化的作用，并通过检测其对肝组织中CYP2E1、p-ERK以及TGF-β/Smad信号转导通路中关键信号传导分子Smad2、Smad3、Smad7表达水平的变化，探讨TTP发挥护肝作用的分子机制。1．夏枯草总三萜对CCL4诱导的急性肝损伤大鼠的作用SD大鼠，各给药组（62.5、125、250mg/kg）和阳性对照组（联苯双酯200mg/kg）预防性给药6天，正常组和模型组分别给予同体积的蒸馏水，灌胃6d。第6天给药1h之后，给药组、模型组和阳性对照组一次性腹腔注射50%四氯化碳（carbontetrachloride，CCL4）0.2ml·100g-1，建立急性肝损伤模型。实验结果显示，与模型组相比，TTP各剂量组可降低急性肝损伤大鼠血清中ALT、AST活性，降低肝匀浆MDA的水平，升高SOD、GSH-Px的水平，抑制肝组织中CYP2E1的表达；同时，病理组织学检查结果显示TTP各剂量组大鼠肝组织病变程度明显减轻。提示TTP对CCL4致大鼠急性肝损伤具有一定的保护作用，其机制可能与抗机体脂质过氧化、抑制CYP2E1表达有关。2．夏枯草总三萜对CCL4诱导的肝纤维化大鼠的保护作用给予大鼠50%CCL4皮下注射12周，建立肝纤维化模型，设立正常组、模型组、TTP给药组（25、50、100mg/kg）、秋水仙碱阳性对照组（0.1mg/kg）。于造模第5周时开始灌胃给药，每周2次，至造模结束。结果显示，模型组ALT、AST、HA、PCIII、CIV等纤维化血清学标志物水平相比于正常组有显著升高，给予TTP可使其明显降低，并可明显降低模型组Hyp。组织病理学结果表明TTP可明显抑制肝纤维化程度，改善肝组织结构，减少胶原沉积。提示TTP对CCL4诱导的大鼠肝纤维化具有良好的保护作用。检测肝匀浆氧化应激指标发现，与正常组相比，模型组大鼠肝匀浆中GSH-Px酶和SOD活性显著下降，而MDA含量显著升高。给予TTP后可显著降低升高的MDA值，并升高SOD和GSH-Px酶活性。提示TTP可缓解大鼠肝脏的氧化应激状态。进一步观察TTP对大鼠肝组织中α-SMA、ProcollagenⅠ、Smad2、Smad3、Smad7mRNA的表达含量的影响，RT-PCR检测结果发现TTP可明显降低模型组大鼠肝组织α-SMA、ProcollagenⅠ、Smad2、Smad3含量，升高Smad7含量；并明显降低肝纤维化大鼠ERK1/2磷酸化程度。提示TTP对CCL4诱导的肝纤维化大鼠具有保护作用，其机制可能与抑制TGF-β/Smad信号通路及ERK1/2过磷酸化有关。