【摘 要】
：
目的:构建心肌致密化不全（Left ventricular noncompaction,LVNC）患者来源的诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells,iPSCs）,并进行心肌细胞的体外诱导分化,将诱导成熟的心肌样细胞（Cardiomyocytes,CMs）进行转录组测序,并观察其细胞骨架及极性相关蛋白的改变情况,初步探讨导致LVNC发病的潜在机制。方法:将LVN
论文部分内容阅读
目的:构建心肌致密化不全（Left ventricular noncompaction,LVNC）患者来源的诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells,iPSCs）,并进行心肌细胞的体外诱导分化,将诱导成熟的心肌样细胞（Cardiomyocytes,CMs）进行转录组测序,并观察其细胞骨架及极性相关蛋白的改变情况,初步探讨导致LVNC发病的潜在机制。方法:将LVNC患者及正常人的尿液细胞进行重编程获得iPSCs细胞系,并体外诱导分化为心肌细胞。对诱导成熟的心肌细胞进行转录组测序,透射电镜观察两组心肌细胞骨架的形态学改变,免疫荧光技术观察细胞骨架相关蛋白纤维状肌动蛋白（F-actin）、微管蛋白二聚体（ɑ/β-tublin）和极性蛋白Par6,黏着斑蛋白（vinculin）在两组心肌细胞中的分布和表达的变化,Western Blot检测细胞骨架及极性Rho/ROCK通路关键蛋白Ras同源基因家族成员A（Ras homolog gene family member A,RhoA）的表达及其磷酸化情况。结果:两组细胞均阳性表达胚胎干细胞表面分子标志物Oct4、Sox2、SSEA4、TRA1-81,且可诱导产生具有自主搏动节律的心肌细胞团,免疫荧光检测示心肌细胞表面标志c Tn T、ɑ-actinin表达阳性,转录组测序结果显示有多个差异基因与微管联系紧密;与对照组相比,透射电镜观察到患者组心肌细胞骨架排列紊乱,免疫荧光发现骨架相关蛋白ɑ/β-tublin表达下调（P<0.01）,提示微管稳定性降低,F-actin表达下调（P<0.001）,vinculin表达下调且分布不均匀,于细胞膜处明显浓聚（P<0.001）,极性蛋白Par6表达上调（P<0.01）,提示细胞极性发生了改变;Western blot结果提示患者组RhoA蛋白表达水平明显上调（P<0.01）,磷酸化程度显著增高。结论:LVNC患者来源的心肌细胞骨架和极性确实存在异常,Rho/ROCK通路关键蛋白RhoA的表达上调及磷酸化水平改变可能是其发生的潜在机制之一。
其他文献
目的:探讨脑源性视觉障碍患儿的临床特征,随访其视力自然转归情况。方式:回顾分析55例脑源性视觉障碍患儿的病史资料、辅助检查结果及视觉功能查体资料,对比脑源性视力损伤患儿的视力水平变化情况。结果:男性患儿35例（63.64%）,女性患儿20例（36.36%）。60%（34例）以上患儿年龄在1岁及以下,接近80%（42例）患儿年龄在3岁及以下。54例（98.18%）CVI患儿有明确病因。50例（90.
背景和目的:脑室内出血和肺出血对新生儿的病程及预后带来严重影响。重度血小板减少症的新生儿存在出血风险,需要通过血小板输注纠正,但输注阈值尚不明确,且不同患儿出血风险不同。本研究主要针对有重度血小板减少症新生儿,预测其生后28天之内发生严重出血的风险,早期评估,早期干预,减少出血事件发生。方法:收集2015年1月-2019年12月重庆医科大学附属儿童医院新生儿病区诊断为重度血小板减少症患儿,对其临床
第一部分:探讨胆道闭锁全身及肝门局部的免疫特征目的:胆道闭锁（BA）是一种涉及先天和适应性免疫反应,以进行性肝炎症和纤维化为特征的新生儿疾病。胆道闭锁的局部和全身免疫反应的机制目前仍不清楚。本研究的目的是定量分析胆道闭锁患儿肝门淋巴结局部及外周血中TBNK淋巴细胞比例的变化,探讨全身及肝门局部的免疫特征。方法:我们采用流式细胞术和免疫荧光技术检测了手术期间获得的肝门、肠系膜淋巴结（LNs）和外周血
目的探讨心动过速性心肌病（TIC）的临床特点,为诊断及鉴别诊断提供依据。方法回顾分析重庆医科大学附属儿童医院2013年1月至2020年9月住院治疗的18例TIC患儿的临床资料,并进行随访。选取同时期住院扩张型心肌病（DCM）患儿40例,分析TIC组和DCM组临床特点、治疗情况及预后。结果18例TIC患儿中16例（88.9%）为房性心动过速。左心收缩功能中-重度受损患儿心动过速负荷程度较左心收缩功能
目的探讨孤独症谱系障碍（Autism Spectrum Disorder,ASD）儿童的血清矿物质水平与其核心症状之间的关系。方法2018年9月至2019年9月在三级甲等医院门诊和特殊教育机构调查了1020例ASD儿童和1038例年龄、性别相匹配的正常儿童（typically development,TD）,采用孤独症行为量表（Autism Behavior Checklist,ABC）,社交反应
目的:探讨Piwil2诱导的肿瘤样干细胞（Piwil2-iCSCs）来源的差异piRNA MW557525对肾母细胞瘤细胞（G401）及Piwil2-iCSCs生物学行为的影响。方法:1通过高通量测序（HTS）筛选了Piwil2-iCSCs的差异piRNA,通过miRanda算法预测目标基因,并对靶基因进行GO和KEGG分析。2采用RT-qPCR检测G401及Piwil2-iCSCs中piRNA
第一部分KIF3A在哮喘小鼠气道中的表达及与气道炎症的相关研究目的:构建小鼠哮喘模型,检测KIF3A在哮喘小鼠气道中的表达及其与气道炎症的相关性。方法:1)选取20只雌性6~8周龄C57BL/6小鼠建立哮喘模型,随机分为哮喘组与对照组（n=10）。哮喘组（Asthma组）小鼠用屋尘螨（house dust mite,HDM）致敏并激发建立哮喘模型,对照组（Control组）用磷酸盐缓冲液（phos
目的:比较经鼻持续正压通气（NCPAP）、经鼻间歇正压通气（NIPPV）及无创高频震荡通气（NHFOV）三种无创通气方式作为初始通气方式在早产儿呼吸窘迫综合征中的有效性及安全性。材料与方法:该试验为多中心回顾性队列研究,收集中国西南地区四个新生儿重症监护中心从2016年12月至2018年12月的需要无创呼吸机辅助通气的孕周<34周的早产儿的基线资料及临床资料。该试验总共纳入了512名患有新生儿呼吸
第一部分 PSTPIP1基因突变相关炎症性疾病致病机制研究目的:PSTPIP1基因突变导致罕见的自身炎症性疾病。目前全球仅有数十例病例,不同的PSTPIP1基因突变患者有着不同的临床表现。A230T、E250Q等突变导致典型的PAPA综合征,表现为化脓性关节炎,坏疽性脓皮病及皮肤痤疮。而E250K,E257K突变则导致PAMI综合征,临床表现为发热、皮疹,血锌/钙卫蛋白升高伴有粒细胞缺乏。本研究分
目的:分析念珠菌血症患儿的临床资料,了解念珠菌血症的临床特点、菌种分布及耐药情况,为儿童念珠菌血症的诊治提供临床经验。方法:收集2014年1月至2020年12月我院微生物学实验室记录中血液念珠菌培养阳性的标本信息,回顾性分析患儿的临床资料。并根据血培养结果分为白色念珠菌组与非白色念珠菌组,比较两组临床特征的差异。结果:1.124例念珠菌血症患儿中,男性66例（53.2%）,女性58例（46.8%）