犬瘟热是由犬瘟热病毒感染引起的一种高度接触性传染病,是当前对宠物饲养业、毛皮动物养殖业和野生动物保护业危害最大的疫病之一。本研究针对目前CD临床不易确诊和病毒分离较为困难以及其对灵长类的猕猴和人也有CD感染病例的情况,建立CDV分子生物学检测方法来解决该病病原诊断的难题,而重点在于建立CDV的RT-PCR和荧光定量RT-PCR快速检测方法,为人们的身体健康和宠物业以及其它动物的健康发展提供技术保障。本研究采集了福建地区多家宠物医院临床发病宠物犬的多种分泌物:血液、尿液、唾液、鼻拭、眼分泌物等,根据以发表CDV F基因序列设计引物进行RT-PCR、SYBR GreenⅠ荧光RT-PCR、Taqman实时荧光定量PCR的检测,经电泳证实,扩增出的F基因片段和理论值一致。这三种检测方法特异性、灵敏度高,可用于CDV的临床快速检测。另外本实验设计了三对引物对野毒株进行扩增F基因的全序列,对产物回收纯化,克隆到PMD18—T载体,并转化到E.coli DH5α,鉴定后将阳性的克隆菌落送到上海生物工程公司进行测序后进行比较分析F保守基因的变化,从基因水平上揭示了毒株之间的差异,这对我国CDV的毒株鉴定、流行病学调查、疫苗研制和临床诊断方法的研究均具有十分重要的理论意义和实际应用意义。