RSV感染小鼠后MMP-9和TIMP-1在肺组织的动态表达及意义

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目的:通过研究RSV感染小鼠后MMP-9和TIMP-1在肺组织中的动态表达,观察气道炎症及胶原沉积的分级,以探讨RSV感染小鼠后有无发生气道重塑。  方法:48只雌性Balb/c小鼠随机分为两组:RSV感染组和对照组,每组24只,其中RSV感染组鼻腔滴入106 PFU的RSV100ul,对照组小鼠鼻腔滴入相同剂量的生理盐水,滴鼻后观察小鼠反应,并分别于滴鼻后当天、3天、7天、14天(各时间点6只)处死小鼠并取材,左肺做HE及VG染色,显微镜下观察气道外周炎症分级和气道胶原沉积分级;右肺做支气管肺泡灌洗液(BALF)的提取,RT-PCR法检测BALF中MMP-9和TIMP-1 mRNA的表达。  结果:  1、气道外周炎症分级情况:RSV感染组和对照组之间有显著性差异,且RSV感染组气道炎症分级显著高于对照组;对照组各时间点之间的气道炎症分级无显著性差异;RSV感染组各时间点之间的气道炎症分级比较,RSV感染后随着时间的延长,气道炎症分级逐渐升高,在感染第7天时气道炎症分级达最高峰,在感染第14天时,气道炎症分级下降。  2、气道外周胶原沉积分级情况:RSV感染组和对照组在当天至第7天胶原沉积分级均无显著性差异;在第14天时,RSV感染组气道外周胶原沉积分级高于对照组;对照组各时间点之间的气道胶原沉积分级无显著性差异;RSV感染组各时间点之间的气道胶原沉积分级比较,RSV感染当天至第7天均未见明显胶原沉积,在感染第14天时,气道外周可见明显胶原沉积。  3、BALF中MMP-9和TIMP-1 mRNA的测定:RSV感染组小鼠BALF中MMP-9和TIMP-1mRNA的表达量与对照组比较,MMP-9在RSV感染第3天和第7天表达量显著升高,TIMP-1在RSV感染第3天和第14天表达量显著升高;对照组各时间点两因子的表达无显著性差异;RSV感染组各时间点两因子的表达比较,MMP-9的表达随时间延长,表达量呈持续升高趋势,第7天达最高峰,与感染后当天、3天,14天比较有显著性差异,第14天下降;而TIMP-1的表达在RSV感染当天至第3天呈上升趋势,在第14天时达到高峰。  4.RSV感染组和对照组各时间点BALF中MMP-9/TIMP-1的变化:对照组各时间点中的MMP-9/TIMP-1表达无明显差异;与RSV感染组其余各时间点比较,RSV感染第7天,MMP-9/TIMP-1明显增高,RSV感染第14天,MMP-9/TIMP-1明显下降。  结论: RSV感染后能启动气道重塑的发生,而 MMP-9/TIMP-1失衡是引起气道重塑发生的可能机制之一。
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