近年来,过继免疫疗法的嵌合抗原受体T（CAR-T）细胞疗法治疗实体瘤存在许多困难,这其中除了实体瘤免疫抑制微环境,另一个重要因素是实体瘤缺少良好的靶点。初期我们构建目前临床已被使用的EGFRVⅢ CAR-T细胞,实验发现该CAR结构也能识别对野生型EGFR,故目前需要寻找新的治疗靶点。血小板源性生长因子受体 α 多肽（platelet-derived growth factor receptor alpha,PDGFR α）又称 PDGFRA,PDGFR2,GAS9 或 CD140a 基因,与多种癌症发生发展密切相关,包括中枢神经系统肿瘤。PDGFRA通常在神经胶质瘤中异常高表达,并且PDGF/PDGFR α的扩增/过表达是所有等级的人胶质瘤中的常见事件,以其作为治疗靶点的相关抗体已经成功用于临床治疗,因此是一个良好的治疗靶点。虽然CD140a不是特异性靶点,CAR-T治疗胶质瘤将采取手术后颅内注射,将大大降低非特异性造成的毒性。目的寻找治疗脑胶质瘤CAR-T新的治疗靶点,并探讨CAR修饰的T淋巴细胞（CAR-T）对胶质瘤的体内外杀伤作用。方法1.运用分子克隆方法构建EGFRVⅢ与CD140a CAR分子,利用慢病毒载体将CAR基因转导至T淋巴细胞构建CAR-T细胞。2.通过流式细胞术检测肿瘤表面相关抗原表达。3.利用ELISA法,Luciferase实验评价CAR-T体外细胞毒性。4.建立皮下异位及脑原位胶质瘤模型,利用流式细胞术,免疫荧光,Qpcr,HE染色,评价CART体内杀伤肿瘤效果。并考察CAR-T对荷瘤NSG鼠生存期的影响。结果构建靶向EGFRVⅢ和CD140a的CAR-T细胞,并且对相应肿瘤细胞株进行体内及体外杀伤实验验证,其中EGFR野生型或者EGFRVⅢ突变型肿瘤细胞均被EGFRVⅢ CAR-T识别,并诱导其释放出细胞因子如IFN-γ和IL-2。而CD140aCAR-T体外可以特异性识别CD140a抗原表达的肿瘤细胞,并产生大量细胞因子IFN-γ和IL-2,而对CD140a抗原表达不足的肿瘤细胞几乎无效。在体内皮下异位模型和脑部原位肿瘤模型中,与未处理T细胞相比,CD140a CAR-T细胞能大量浸润到CD140a阳性肿瘤组织中,对肿瘤有明显的抑制作用,有效延长小鼠生存期。结论EGFRVⅢ CAR-T对EFGR野生型肿瘤有效果,靶向CD140a的CAR-T细胞能够在体内外特异性杀伤CD140a高表达的胶质瘤,因此,CD140a可以作为治疗胶质瘤的CAR-T靶点。