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第一部分龙胆苦苷对匹罗卡品诱导癫痫小鼠的抗癫痫作用及脑内炎症反应的影响目的:探讨龙胆苦苷对匹罗卡品诱发癫痫小鼠的抗癫痫作用及脑内炎症反应的影响。方法:腹腔注射匹罗卡品(Pilocarpine,PILO 280mg/kg)建立小鼠癫痫模型,随机分为正常组,龙胆苦苷(Gentiopicroside,Gent 800mg/kg)组,模型(PILO)组和龙胆苦苷Gent(800mg/kg)+模型(PILO)组。采用SMUP-U4生物信号处理系统检测各组小鼠大脑皮层痫样放电;采用胶质纤维酸性蛋白免疫组织化学染色的方法检测各组小鼠脑内星形胶质细胞(Astrocyte,AST)的活化;采用Western blot方法检测各组小鼠脑内TLR-4、IKK-β、p-IKK-β、IκB-α、p-IκB-α、NF-κB、p-NF-κB、IL-1β、TNF-α和IL-6蛋白表达。结果:与模型组比较,Gent(800 mg/kg)能显著减少脑电图的平均波幅及总功率;与模型组比较,Gent(800 mg/kg)可以抑制PILO诱导的小鼠癫痫后星形胶质细胞活化增殖;Western blot结果显示,与模型组比较,Gent(800mg/kg)能显著性抑制TLR-4、p-IKK-β、p-IκB-α、NF-κB、p-NF-κB、IL-1β、TNF-α和IL-6蛋白的表达(p<0.05),IκB-α的蛋白表达也明显上调(p<0.05),但不影响IKK-β和NF-κB的蛋白的表达(p>0.05)。结论:Gent对PILO诱发癫痫小鼠具有明显的抗癫痫作用,并抑制癫痫小鼠脑内炎症反应,调节TLR-4/NF-κB信号通路,可能与龙胆苦苷抑制星形细胞炎症反应有关。第二部分龙胆苦苷对脂多糖诱导星形胶质细胞炎症反应的影响目的:探讨Gent对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱发的星形胶质细胞炎症反应的影响。方法:采用LPS(1μg/ml)诱导星形胶质细胞炎症反应,并随机分为正常组,模型组和不同浓度龙胆苦苷Gent干预组。采用ELISA法检测各组细胞培养液内IL-1β、IL-6和TNF-α等促炎症因子的含量;采用Western blot法检测检测各组细胞中TLR-4、IKK-β/p-IKK-β、IκB-α/p-IκB-α以及NF-κB/p-NF-κB蛋白的表达。结果:与模型组比较,ELISA结果显示Gent可以明显减少LPS诱导的星形胶质细胞炎症因子IL-1β(p<0.05),TNF-α(p<0.05)和IL-6(p<0.05)的释放;Western blot结果显示,与模型组相比,Gent对IKK-β、IκB-α和NF-κB的蛋白表达无影响(p>0.05),但能显著性抑制TLR-4(p<0.05)、p-IKK-β(p<0.05)、p-IκB-α(p<0.05)、p-NF-κB(p<0.05)的蛋白表达。结论:龙胆苦苷调节星形胶质细胞TLR-4/NF-κB信号通路抑制星形胶质细胞炎症反应,可能是龙胆苦苷抗癫痫的作用机制。