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目的:观察电针刺激不同穴位对功能性腹泻大鼠空肠、回肠、结肠5-HT、5-HT3R平均光密度值和SERT mRNA的影响,从分子生物学水平探讨肠动力障碍的穴位特异性和电针治疗功能性腹泻的作用机制,为临床针灸治疗功能性腹泻提供理论支撑与临床指导方面具有重大意义。 方法:选用功能性腹泻大鼠60只,雌雄各半,体重(200±10g)。采用番泻叶灌胃制备功能性腹泻证模型,将实验动物随机分为空白组、模型组、天枢穴组、大肠俞组、曲池组、上巨虚组,空白组不作任何处理,模型组番泻叶灌胃造成腹泻模型后继续给药,天枢穴组、大肠俞组、曲池组、上巨虚组给予造模成功的腹泻型大鼠予以电针刺激,选择疏密波,频率为疏波3Hz,密波15Hz,电流强度以引起大鼠肢体轻微抖动为度,留针30分钟,1次/日,10次为一疗程,1个疗程后评定疗效,空白组和模型组不做电针处理。观察各组功能性腹泻的大鼠经过电针刺激后粪便的改善情况,用免疫组化法检测大鼠空肠、回肠、结肠上端、结肠下端的5-HT、5-HT3R的表达和对SERTmRNA的影响情况。 结果:1.各组大鼠空肠、回肠、结肠上端、结肠下端黏膜5-HT、5-HT3R表达比较功能性腹泻大鼠模型组与空白组相比其空肠5-HT及5-HT3R平均光密度值明显增加(P<0.01)电针干预四组中,天枢组能够显著降低5-HT及5-HT3R平均光密度值(P<0.05),上巨虚组和曲池组不能显著影响5-HT及5-HT3R平均光密度值(P>0.05),但从其数值变化而言,能够提升其平均光密度值。 功能性腹泻大鼠模型组与空白组相比其回肠5-HT及5-HT3R平均光密度值有所增加(P<0.05),电针干预四组均未显著影响5-HT及5-HT3R平均光密度值(P>0.05),但天枢组对平均光密度值略为降低,上巨虚组对平均光密度值略为提高。功能性腹泻大鼠模型组与空白组相比其结肠上段5-HT及5-HT3R平均光密度值无明显影响(P>0.05),电针干预四组均不能显著影响5-HT及5-HT3R平均光密度值(P>0.05)。 功能性腹泻大鼠模型组与空白组相比其结肠下段5-HT及5-HT3R平均光密度值无明显影响(P>0.05),电针干预四组均不能显著影响5-HT及5-HT3R平均光密度值(P>0.05)。 2、电针不同单穴对功能性肠病大鼠空肠、回肠、结肠上段、结肠下段黏膜SERTmRNA表达的影响 功能性腹泻大鼠模型组与空白组相比其空肠SERTmRNA表达明显降低(P<0.01),天枢组能够显著增加SERTmRNA表达(P<0.05),大肠俞组不能显著影响SERTmRNA表达(P>0.05),上巨虚组和曲池组不能显著影响SERTmRNA表达(P>0.05),但从其数值变化而言,能够降低SERTmRNA表达。 功能性腹泻大鼠模型组与空白组相比其回肠SERTmRNA表达明显降低(P<0.01),电针干预四组均未显著影响SERTmRNA表达(P>0.05),但天枢组SERTmRNA表达略为升高,上巨虚组SERTmRNA表达略为降低。 结论:1、空肠黏膜中的5-HT及5-HT3R可能对功能性腹泻的发病起着重要的作用,功能性腹泻大鼠空肠黏膜中的5-HT及5-HT3R平均光密度值明显升高,提示5-HT及5-HT3R的高表达是引起大鼠大便次数增多、便质稀溏的主要原因之一。 2、功能性腹泻大鼠结肠黏膜上的5-HT及5-HT3R的分泌增高,可能是产生肠蠕动功能异常和内脏敏感性增加的病理生理基础之一。 3、天枢组能够显著增加SERTmRNA表达(P<0.05),说明电针天枢可使空肠神经元突触间隙内的5-HT摄取增多,致使空肠蠕动及分泌功能减弱。