三种离心方法对L-PRF生物学特性的影响

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目的:通过比较三种离心方法制备的富白细胞富血小板纤维蛋白(L-PRF)的凝胶结构特点,白细胞、血小板回收率及生长因子释放量与释放规律,深入了解L-PRF的生物学特性,为动物实验和临床应用研究提供实验依据。方法:采用三种离心方法(方法一:2500rpm/min,10min;方法二:3000rpm/min,10min;方法三:4000rpm/min,10min)制备L-PRF。通过光镜和扫描电镜(Scanning electron microscope, SEM)观察,对L-PRF凝胶的显微和超微结构进行比较和分析;通过血细胞计数(Complete blood count,CBC)和elisa法分别检测L-PRF凝胶白细胞、血小板浓度,及L-PRF膜体外释放转化生长因子-β1(Transforming growth factor-betal, TGF-β1)血小板衍生生长因子-AB (Platelet-derived growth factor, PDGF-AB)的浓度。结果:(1)三种离心方法均可制备出L-PRF凝胶,显微和超微结构观察到L-PRF的主体结构为纤维蛋白聚集形成的立体网络结构,血小板与白细胞主要集中在L-PRF凝胶的底部(红色着色部分)。(2)三种离心方法制备的L-PRF凝胶血小板与白细胞计数明显高于全血。2500rpm/min与3000rpm/min制备的L-PRF凝胶血小板与白细胞回收率较高,与4000rpm/min者之间的差异有统计学意义(P<0.05),而2500rpm/min与3000rpm/min间的差异无统计学意义(P>0.05)。(3)三种离心方法制备的L-PRF膜体外释放TGF-β1、PDGF-AB的规律基本一致。2500rpm/min与3000rpm/min制备的L-PRF膜在实验周期内TGF-β1、PDGF-AB的总释放量高于4000rpm/min(P<0.05),2500rpm/min与3000rpm/min间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:采用三种离心方法都可以制备L-PRF凝胶,且三种L-PRF凝胶中的细胞分布及纤维蛋白结构未见明显差异。2500rpm/min与3000rpm/min制备的L-PRF凝胶白细胞与血小板的回收率及TGF-β1、PDGF-AB总释放量高于4000rpm/min,2500rpm/min与3000rpm/min之间没有区别。图24幅,表10个,参考文献64篇
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