【摘 要】
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目的:探讨Beclin1对宫颈癌SiHa细胞中p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达的影响。方法:用lipofectamine 2000将Beclin1基因的表达质粒pcDNA3.1(+)-Beclin1和干扰质粒pSUPER-Becli
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目的:探讨Beclin1对宫颈癌SiHa细胞中p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达的影响。方法:用lipofectamine 2000将Beclin1基因的表达质粒pcDNA3.1(+)-Beclin1和干扰质粒pSUPER-Beclin1转染SiHa细胞,设置实验组((1):pcDNA3.1(+)-Beclin1;(2):pSUPER-Beclin1)、阴性对照组((3):pcDNA3.1(+)空载组;(4):pSUPER空载组)、空白对照组((5)组),用qRT-PCR技术检测各组Beclin1的mRNA表达情况。在转染成功后的48h提取各组细胞总RNA,72h提取细胞总蛋白,分别用qRT-PCR和Western blot技术检测p-PI3K、p-AKT、p-mTOR在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果:1.在SiHa细胞中转染Beclin1的表达质粒pcDNA3.1(+)-Beclin1和干扰质粒pSUPER-Beclin1后,qRT-PCR检测,结果显示过表达组中的Beclin1的mRNA水平明显增高,沉默组中的Beclin1的mRNA水平明显降低,说明转染成功。2.Beclin1在宫颈癌SiHa细胞中过表达后,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR在mRNA和蛋白水平较阴性对照组和空白对照组的表达均降低(P<0.05)。3.Beclin1在宫颈癌Si Ha细胞中沉默后,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR在mRNA和蛋白水平较阴性对照组和空白对照组的表达均升高(P<0.05)。结论:1.Beclin1在宫颈癌SiHa细胞中过表达后,PI3K/AKT/mTOR通路中的相关蛋白在mRNA和蛋白水平的表达降低。2.Beclin1在宫颈癌SiHa细胞中沉默后,PI3K/AKT/mTOR通路中的相关蛋白在mRNA和蛋白水平的表达升高。
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