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质粒DNA作为基因治疗剂受到研究者的重视和深入的研究。质粒DNA作为基因载体比较安全、使用方便，但质粒DNA在靶细胞中的基因表达效率低、持续时间短。pUDKH是自行构建的携带HGF的重组质粒，能够促进血管生成。实验目的：对基因治疗剂质粒pUDKH的质量进行分析及质量控制。实验方法：采用阴离子交换色谱法监测质粒生产过程和质粒产品中超螺旋pUDKH的比例，所用的色谱条件为：色谱柱Tsk-gel DNA-NPR[0.46cm（id）×7.5cm（1）]；流动相20mmol／L Tris-HCl，1mol／LNaCl pH8.8梯度洗脱。 质粒pUDKH生产过程中需加入去污剂（Triton X-100）溶液，随后需除去这些物质，并检测其在最终产品中的残留含量。方法 用反相液相色谱测定质粒产品的Triton X-100含量，色谱系统包括C18色谱柱HYPERSIL ODS2（250×4.6mm），洗脱溶剂为乙腈：水=70：30（V／V），流速：1.0ml／min，进样量10μl，检测波长223nm。结果 回收率为100.19±4.23，日内精密度为4.36％，日间精密度为4.17％，Triton X-100在1.25～20μg／ml浓度范围内呈线性关系。结论Triton X-100的检测最低限可达1.25μg／ml，有良好的准确度与精密度，样品不需预处理，不受其它成分的干扰。pUDKH产品中的TritonX-100含量在2.27～3.00μg／ml之间。ELISA（酶联免疫）法测样品中宿主蛋白质含量，对96孔板中的样品用酶联仪Elx-800测其570nm的吸收值，OD值对蛋白浓度作图，据标准曲线计算样品中残留蛋白含量；Northern分子杂交半定量法测定残留宿主DNA含量；同时采用鲎试剂法测定内毒素含量。结果表明：质粒中超螺旋pUDKH含量达95％（质量百分比）以上，残留核糖核酸RNA检测不到，宿主蛋白含量小于10mg／mg质粒DNA，残留宿主DNA含量小于2ng／mg质粒DNA，内毒素含量约0.00178EU／mg。