目的:用自噬抑制剂3-methyladenine和自噬诱导剂rapamycin(雷帕霉素)探讨醒脑静注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤后自噬相关基因Beclin1、LC3与凋亡相关基因Bcl-2表达的影响及其可能的神经保护作用机制。　　方法:健康雄性SD大鼠随机分成a、b、c、d、e、f、g、h、i九个组,a组为假手术组(sham,仅分离血管但不进行其他操作)、b组为缺血组1、c组为缺血组+溶媒组(简称溶媒组)、d组为缺血组+自噬抑制剂3-methyladenine(简称3MA组)、e组为缺血组+自噬诱导剂rapamycin(简称雷帕组)、f组为缺血组+醒脑静(简称醒脑静组)、g组为缺血组+醒脑静+自噬抑制剂(简称醒脑静+3MA组)、h组为缺血组+醒脑静+自噬诱导剂(简称醒脑静+雷帕组)、i组为缺血组2。采用改良Longa线栓法建立大鼠右侧大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型,插线后2h拔出栓线,实行再灌注(假手术组仅暴露血管不做缺血再灌注)。再灌注后给予鼠尾静脉注射溶媒、自噬抑制剂、自噬诱导剂、醒脑静注射液(持续给药3d,1ml/1次/d)。采用Zealonga报道的评分法,术后24h观察大鼠行为学症状评分;各组大鼠在末次给药后12h后取脑组织,采用HE染色观察脑组织病理学变化,TUNEL染色方法检测脑组织细胞凋亡情况,免疫组织化学SP法检测各组Beclin1、LC3、Bcl-2的表达水平,透射电镜观察脑缺血再灌注损伤后神经细胞内自噬体的形成。　　结果: HE染色结果显示:假手术组细胞结构正常,其他各模型组大鼠右侧脑组织出现明显的病理改变,镜下可见神经细胞排列紊乱,界限不清楚,胞体肿胀,胞浆疏松,核体不规则,有明显软化灶形成,周边可见炎性细胞浸润,溶媒组与缺血组比较无明显差异,而醒脑静组、3MA组、醒脑静+雷帕霉素组较缺血组、醒脑静+3MA组、雷帕霉素组病理变化得到明显改善。免疫组化显示:Beclin1在各模型组的表达高于假手术组,着色加深,免疫反应性增强(P<0.05),在醒脑静组、3MA组、醒脑静+3MA组表达低于缺血组、雷帕霉素组、醒脑静+雷帕霉素组(P<0.05)。LC3在各模型组的阳性率高于假手术组(P<0.05),在醒脑静组、3MA组、醒脑静+3MA组表达低于缺血组、雷帕霉素组、醒脑静+雷帕霉素组(P<0.05)。Bcl-2在各模型组的表达高于假手术组(P<0.05),在醒脑静组、醒脑静+雷帕霉素组表达明显高于缺血组。TUNEL染色显示:凋亡神经元阳性细胞主要见于梗死灶周围的纹状体及额顶部皮质,假手术组有少量凋亡细胞存在,醒脑静组阳性细胞数相对较其他模型组低。透射电镜结果显示缺血组可见明显的自噬体形成。透射电镜结果显示:神经细胞排列紊乱,可见大量空泡和液化灶,双层膜囊泡内包裹了部分胞浆物质,胞膜轮廓不清,线粒体肿胀变形,有时可见自噬体包裹的线粒体残体,细胞核固缩,可见大量吞噬体。　　结论:脑缺血再灌注损伤后有自噬体参与,在大鼠脑缺血再灌注损伤后自噬相关基因Beclin1、LC3与凋亡相关基因Bcl-2的表达较假手术组均上调;醒脑静注射液能上调Bcl-2,下调Beclin1、LC3,减少凋亡细胞,减轻脑组织病理改变,减轻了脑缺血再灌注损伤;醒脑静注射液对脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,可改善神经功能缺失,可能与上调Bcl-2,下调Beclin1、LC3相关。