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浏阳豆豉是以黑豆为原料经发酵而成。本文以浏阳豆豉及黑豆为研究对象,研究了超声波乙醇提取大豆异黄酮的工艺,并对异黄酮的纯化工艺进行了探索,同时对异黄酮的HPLC-MS检测条件进行研究。本文旨在通过对豆豉及黑豆中异黄酮的研究,充分认识其营养价值,为进一步研究提供数据。其主要研究结果如下。1超声波乙醇提取大豆异黄酮工艺采用超声波乙醇提取的方法对大豆异黄酮的提取工艺进行了研究。选择提取温度、乙醇浓度、料液比、超声波时间为考察因素,做正交试验设计,确定超声波浸提的最佳工艺条件。研究结果为乙醇浓度为60%、料液比为1：8、时间为30min、温度为80℃。根据极差值分析可知,各试验因素对大豆异黄酮得率的影响顺次为：乙醇浓度>料液比>提取时间>提取温度。在此条件下,黑豆提取大豆异黄酮得率为3.413%,豆豉提取大豆异黄酮得率为3.237%。用紫外分光光度法建立了大豆异黄酮含量的测定方法,回归方程为：A=0.0827X+0.0109,R2=0.9993(A为吸光度,X为总大豆异黄酮浓度,mg/1),因此,吸光度与大豆异黄酮浓度之间有良好的相关性。2豆豉中异黄酮的定性定量分析通过对豆豉中大豆异黄酮色谱条件试验,建立如下色谱条件：色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C8,4.6nm×15cm,温度：35℃,流速为1mL/min,进样量为5μL。在20 min内得到分离度很好的6种异黄酮,分别是大豆苷、染料木苷、乙酰型大豆苷、大豆苷元、黄豆黄素、染料木素。其中大豆苷的保留时间为2.459min,染料木苷的保留时间为3.141min,大豆苷元保留时间为9.836min,染料木素的保留时间为15.812min.用甲醇和水为流动相,在0-10min内流动相A：B=30：70,10-20min时变为70:50.梯度洗脱。测得豆豉中总异黄酮含量为0.149%,大豆苷含量为0.0008%,染料木苷含量为0.0024%,大豆苷元含量为0.0275%,染料木素含量为0.0379%。3黑豆中异黄酮的定性定量分析通过对黑豆中大豆异黄酮色谱条件试验,建立如下色谱条件：色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C8,4.6nm×15cm,温度：35℃,流速为ImL/min,进样量为5μL。黑豆的液相色谱在13-22min内得到9种异黄酮,分别是大豆苷、丙二酰型大豆苷、黄豆黄苷、丙二酰型黄豆黄苷、丙二酰型染料木苷、乙酰型染料木苷、染料木素、大豆苷元、黄豆黄素。其中大豆苷的保留时间为13.874min,大豆苷元保留时间为20.184min,染料木素的保留时间为21.412min.用甲醇和水为流动相,在0～18min内A：B=30：70,18-25min时流动相变为70：50,线性梯度洗脱。全黑豆中异黄酮的含量为0.183%,大豆苷元含量为0.013%,染料木素含量为0.018%,大豆苷含量为0.035%,丙二酰型染料木苷含量为0.034%,丙二酰型黄豆黄苷含量为0.036%,乙酰型染料木苷含量为0.028%。