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目的:阿尔茨海默病(Alzheimers disease,AD)是老年痴呆症中最常见的一种进行性发展的致死性神经退行性疾病,以进行性的认知功能障碍及精神行为损害为特征,发病率随着世界老年人口的增多迅速抬高。研究表明围绕β-淀粉样蛋白(Aβ)的沉积引发的免疫炎症反应在AD的发病过程中发挥着重要作用,同时伴有神经炎症细胞的改变,多种转录因子的参与,致神经元损伤及凋亡。现已发现作为一种肿瘤抑制基因的p53参与AD病程中。本研究利用APP/PS1转基因鼠检测随鼠龄的增加,AD鼠脑内星形胶质细胞的胶质纤维酸性蛋白及p53蛋白表达的改变。 方法:选择4月龄和12月龄的雄性APP/PS1转基因小鼠作为实验组,选择4月龄和12月龄的雄性野生型C57BL/6小鼠作为对照组,实验组和对照组每组小鼠共计20只,4月龄和12月龄各占10只,其中随机选出5只用多聚甲醛灌注,固定断头取脑后沿脑部矢状缝平分脑组织,一半经多聚甲醛固定、脱水、石蜡包埋后用于免疫组化染色,一半经脱水、液氮冷冻、OCT包埋后免疫荧光染色,其余5只直接断头取脑后于-80℃冷冻,运用Western blot检测方法做定量分析。应用石蜡切片经免疫组化方法检测Aβ及胶质纤维酸性蛋白在小鼠脑内的表达;应用冰冻切片做免疫荧光双标观察小鼠脑内星形胶质细胞的GFAP和p53蛋白的共表达;应用Western-Blot方法定量检测小鼠额叶皮层和海马内胶质纤维酸性蛋白的动态变化。 结果:应用免疫组织化学方法,发现雄性APP/PS1转基因鼠中12月龄同4月龄小鼠相比脑内Aβ的沉积增多、星形胶质细胞的纤维酸性蛋白及p53蛋白表达量增加,而雄性野生型小鼠C57BL/6脑内未见Aβ的沉积和p53蛋白表达;在12个月龄和4个月龄APP/PS1转基因小鼠脑内,伴随Aβ沉积的增加其周围的星形胶质细胞的形态发生改变且表达增加;应用免疫荧光双标,发现在12个月龄和4个月龄APP/PS1转基因小鼠脑内,均有GFAP及p53蛋白的共表达,且随着鼠龄的增加两者均呈现高表达,p53蛋白表达部位主要分布在细胞核内和核周区;采用Western blot方法做定量检测,实验组雄性APP/PS1转基因小鼠较对照组野生型小鼠脑内GFAP蛋白表达增加,两组有显著的统计学差异(P<0.05)。 结论:随着鼠龄的增加,AD鼠脑内Aβ的沉积增多;伴随Aβ的沉积,随着鼠龄增加星形胶质细胞的损伤程度增加,其形态也出现异常;p53蛋白在星形胶质细胞内表达,且随着鼠龄的增加,呈现高表达;这些说明在AD的发病过程中,p53可能参与诱导星形胶质细胞的损伤过程。