肝素化PLGA超细纤维膜及电纺血管组织工程支架研究

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通过静电纺丝技术可以制备出直径在数十纳米至几微米的聚合物超细纤维。超细纤维无规沉积得到无纺布状的电纺纤维毡,其具有很大的比表面积和多孔结构,是一种具有良好应用前景的组织工程支架材料。本文首先利用电纺法制备了乙交酯丙交酯共聚物(PLGA)超细纤维,通过两种肝素化方法,即物理共混肝素和表面偶联肝素的方法,得到肝素化的PLGA电纺纤维膜,以提高材料的抗凝血性能。使用扫描电子显微镜(SEM),研究了两种肝素化方法和肝素加入量对超细纤维形貌的影响。使用傅立叶变换红外光谱(FT-IR)、X射线光电子能谱(XPS),证明了肝素化后的材料表面化学成分的变化。通过细胞粘附增殖试验血小板粘附、动态凝血试验和凝血时间检测等测试了材料的生物相容性和抗凝血性能。结果表明,在电压20kV、流速1.0ml/h和接收距离20cm的电纺条件下,可得平均直径为262±62nm的PLGA超细纤维。在纺丝液中共混肝素会使纤维直径变得更细,珠丝更少,这种趋势随着肝素加入量的增加更加明显。PLGA超细纤维经过偶联反应后,纤维有少量断裂和团聚现象,可以基本保持纤维结构。FT-IR和XPS证实了肝素已被引入到PLGA电纺膜上。细胞相容性和血液相容性测试证明了两种肝素化方法都提高了PLGA电纺膜的抗凝血性能,而物理共混肝素电纺PLGA材料与表面偶联肝素的PLGA电纺膜相比具有更好的抗凝效果,且抗凝能力与肝素的加入量成正比。共混肝素会对细胞的生长和粘附造成明显的抑制作用,而表面偶联肝素后的PLGA电纺膜未明显表现出对细胞生长和粘附的抑制作用。采用上述的电纺条件和肝素化方法,使用专门设计制作的接收装置,制备出了直径1-4mm的小口径PLGA管状电纺组织工程支架,观察了材料的微观形貌,分析了材料的力学性能和细胞生长状况。结果表明,电纺管由无纺超细纤维沉积而成,具有多孔结构,力学强度良好。润湿后的,其柔顺性增加。培养平滑肌细胞7天后,细胞可以在管状支架表面良好粘附,并生长成细胞层。
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