目的: 1.建立分枝杆菌定量杀灭试验方法,研究常用消毒剂对分枝杆菌的杀灭效果。 2.研究分枝杆菌hsp65基因多态性。 3.研究分枝杆菌hsp65基因多态性与其对消毒剂抵抗力之间的关系。 4.筛选出用于消毒剂对分枝杆菌消毒效果鉴定的参考试验菌株。 5.初步建立毛细管电泳技术在用于分枝杆菌基因多态性研究的试验方法,并对此方法做出初步评价。 方法: 1.选择草分枝杆菌、耻垢分枝杆菌、偶发分枝杆菌、变黄分枝杆菌、迪氏分枝杆菌、龟分枝杆菌脓肿亚种、无色分枝杆菌、蟾分枝杆菌、结核分枝杆菌弱毒株H37Ra和牛分枝杆菌共10株分枝杆菌标准菌株,和含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧乙酸消毒剂、含戊二醛消毒剂、乙醇类消毒剂和甲酚消毒剂共6种消毒剂进行研究。 2.依照我国《消毒技术规范》第三版对定量杀菌试验的要求,采用小三角瓶振摇方法分散试验分枝杆菌,建立了分枝杆菌悬液定量杀灭试验。 3.采用建立的分枝杆菌定量杀灭试验检测各种试验消毒剂对试验分枝杆菌的杀灭效果。 4.采用试剂盒提取分枝杆菌基因组DNA,按参考文献设计引物对分枝杆菌的hsp65基因片段进行PCR扩增,然后用限制性内切酶BstEⅡ和HaeⅢ对所