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目的:应用全基因组扫描、连锁分析的方法对一个常染色体显性遗传的先天性白内障家系进行基因定位;从定位的染色体区域内寻找候选基因,通过基因序列分析对候选基因进行突变筛查;并对家系患者在白内障手术中摘除的晶状体做形态学研究,从而进一步探求致病基因与临床表型之间的关系。 方法:对家系患者进行详细的临床检查,排除其他疾患,确定临床表型。将家系患者在白内障手术中摘除的晶状体做光镜及电镜的形态学检查。提取家系成员外周血DNA,选取分布在GJA8、CRYGS、BFSP2、PTX3、MIP、HSF4、CRYAA、CRYAB、CRYBB1、CRYBB2基因上下2厘摩(centimorgan,cM)范围内的微卫星标记物,通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法确定单体型;对CRYGC、CRYGD、GJA3及CRYBA1基因直接测序,以确定该家系致病基因是否为已知的常染色体显性遗传先天性白内障(autosomal dominant congenital cataract,ADCC)基因。在全部常染色体范围内选取370对荧光微卫星标记物进行全基因组扫描,相邻微卫星标记物之间的平均距离为10cM。利用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)对全部荧光微卫星标记物进行扩增后,在ABI 3130—avant全自动遗传分析仪上读取370对微卫星标记物的等位基因片段大小,并利用Genescan 3.1和Genotyper 2.0软件进行两点法计算LOD值并构建单体型。运用Sim Walk2,Version3.35软件按照多点法分别计算疾病表型与不同染色体上的多个微卫星位点之间的最大优势对数Lod score。根据连