【摘 要】
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连翘是常见的清热解毒的中草药,具有很好的抗炎作用,连翘酯苷A、连翘苷、连翘脂素是连翘中潜在的抗炎活性物质。近红外光谱对药物的质量控制是最近的热点之一,有效物质的含量是保证药效的基础。本文主要利用近红外光谱对连翘进行质量分析,同时对连翘水提取物的抗炎活性进行研究,研究内容分为以下四个方面:第一部分使用HPLC测定连翘药材中主要抗炎活性物质连翘酯苷A、连翘苷和连翘脂素的含量,发现青翘的和老翘中连翘酯苷
【基金项目】
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广东省重点领域研发计划项目《无抗饲料生物合成关键技术研究与应用》（2019B020218003）； 非洲猪瘟疫苗创制及防控制剂研究及应用（20190211）；
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连翘是常见的清热解毒的中草药,具有很好的抗炎作用,连翘酯苷A、连翘苷、连翘脂素是连翘中潜在的抗炎活性物质。近红外光谱对药物的质量控制是最近的热点之一,有效物质的含量是保证药效的基础。本文主要利用近红外光谱对连翘进行质量分析,同时对连翘水提取物的抗炎活性进行研究,研究内容分为以下四个方面:第一部分使用HPLC测定连翘药材中主要抗炎活性物质连翘酯苷A、连翘苷和连翘脂素的含量,发现青翘的和老翘中连翘酯苷A和连翘苷的含量差异性很大,连翘脂素的含量较少,差异很小。连翘酯苷A、连翘苷、连翘脂素的含量数据为后续的近红外光谱对连翘的定性和定量分析提供了数据支持;也为连翘抗炎活性物质的研究提供理论依据。第二部分是近红外光谱技术在连翘定性分析中的应用。采用判别分析法建立“青翘”和“老翘”的定性分析模型,校准集和预测集样本都位于相应的象限中（P＜0.05）。结果显示,所有样品能被准确分类,分析结果准确度高。第三部分使用偏最小二乘法（PLS）分别建立连翘中连翘酯苷A、连翘苷、连翘脂素的定量分析模型,所建定量分析模型RPD值在良好范围内,预测准确度高,能用于连翘酯苷A、连翘苷、连翘脂素快速测定。第四部分采用LPS刺激RAW264.7细胞建立炎症模型,通过检测细胞凋亡率、NLRP3、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、PI3K和AKT等指标,观察不同浓度的FWA对RAW 264.7细胞炎症模型的作用。FWA对细胞自噬和PI3K-AKT-m TOR通路的影响。结果表明,连翘水提取液能够抑制RAW264.7细胞的凋亡,在2~0、2-1、2-2及2-3mg/m L能促进细胞的增值（P＜0.05）;FWA最适给药浓度为0.1 mg/m L、0.2 mg/m L和0.4 mg/m L;0.4mg/m L FWA能够抑制NLRP3等炎性蛋白的释放（P＜0.05）,降低LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值,促进PI3K和AKT蛋白的表达。进一步提示,连翘水提取液潜在的抗炎机制可能通过激活了PI3K/AKT通路,抑制了自噬。
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