黄瓜是一种重要的蔬菜作物，栽培历史悠久，在我国乃至世界范围栽培面积广泛。但由于蚜虫、茶黄螨、白粉虱、蓟马等的危害，给黄瓜生产时常造成重大损失。而且由于害虫防治引发的农药残留、环境污染、害虫抗药性、生态平衡破坏等一系列问题，已引起人们的广泛关注。选育抗虫黄瓜新品种是持续控制害虫的根本措施，但由于黄瓜抗虫资源缺乏，限制了黄瓜抗虫育种研究。通过基因工程方法将外源抗虫基因导入黄瓜，创造黄瓜抗虫新材料，是一种较常规育种更为有效、快速的方法，是育种家关注的一个重要课题。 本研究的目的是建立高效的黄瓜遗传转化体系，通过农杆菌介导法和花粉管通道法将抗虫基因EQKAM转入黄瓜，获得黄瓜转基因阳性植株，为进一步获得抗虫黄瓜新品种奠定基础。 通过对苗龄、品种、外植体类型、生长激素种类及浓度、分裂素浓度、糖源种类及浓度等影响器官发生的因素进行研究，建立了高效、稳定的黄瓜离体体细胞再生体系：以培养3-4天的无菌苗子叶为外植体，诱导培养基以MS为基本培养基，附加BA2.0mg/L，NAA0.5 mg/L，ABA10mg/L，蔗糖60g/L，琼脂7g/L。该体系对多数黄瓜材料出芽率和每外植体出芽数均较高，其中T55材料，每外植体出芽数最多可达3.82。该体系可应用于农杆菌介导的遗传转化。 对农杆菌介导的遗传转化体系进行优化研究，结果表明：以子叶为外植体，采用切成两块法，近生长点部位插入培养基，在菌液和共培养中加入乙酰丁香酮，采用前7天卡那霉素延迟筛选方法为较好的农杆菌介导的遗传转化体系。最高抗性芽出芽率可为17％。共再生植株40株，田间移栽成活32株，PCR检测阳性植株5株，阳性植株转化率为1.02％。 研究了各种花粉管通道法对黄瓜遗传转化的效果，比较了子房注射法、柱头涂抹法、切割柱头法等对座瓜、结籽及转化率的影响。通过比较黄瓜幼苗在不同浓度卡那霉素培养基上的生长表现，确立了阳性植株的筛选方法：播种于Kan 40mg/L琼脂培养基上7-10天后，转入Kan 200mg/L营养液中生长3-4天，剪掉根系并用生长素浸泡1天后扦插于蛭石中，经过逐步淘汰后剩余成活植株为卡那霉素抗性强的植株，进一步进行分子检测。对1500粒子房注射法获得的种子通过卡那霉素抗性筛选和PCR检测，以及Southern斑点杂交结果显示，抗虫基因已经整合到黄瓜的基因组中，转化率为0.9％。