人参皂苷Rh2对LPS诱导前列腺癌细胞PC3增殖的抑制作用

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shouquanwenjian
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目的通过选用脂多糖LPS作用于前列腺癌(Prostate cancer,PC)细胞株PC3,观察TLR4炎症通路的激活对肿瘤细胞的生长影响;通过复制体外炎症模型,选用扶正中药人参的提取物人参皂苷Rh2(ginsenoside Rh2,GRh2)作为研究药物,初步探讨其对前列腺癌细胞PC3增殖的影响,并从炎症和雄激素受体AR角度研究其改善前列腺癌治疗的分子作用机制。方法1.TLR4炎症通路的激活对PC3细胞的生长影响:体外培养前列腺癌细胞PC3,给予TLR4特异性激活剂脂多糖LPS干预,与对照组(Control组)比较观察细胞增殖生长情况;检测上清液炎症因子IL-6和TNF-α分泌情况;同时检测炎症相关蛋白NF-kB p65、p-NF-kB p65、IkB-α和p-IkB-α的表达以及TLR4、AR、NF-kB p65的mRNA表达情况,明确TLR4炎症通路的激活对PC3细胞的生长作用。2.人参皂苷Rh2对LPS诱导前列腺癌细胞PC3增殖的影响:体外培养前列腺癌细胞PC3,设置空白对照组、LPS组、LPS+Rh2组和Rh2组,与LPS组比较,比较观察细胞增殖生长情况;检测上清液炎症因子IL-6和TNF-α分泌情况;同时检测炎症相关蛋白NF-kB p65、p-NF-kB p65、IkB-α和p-IkB-α的表达以及TLR4、AR、NF-kB p65的mRNA表达情况,观察Rh2在LPS诱导前列腺癌细胞PC3增殖的抑制作用。结果1.相对于对照组,在处理12h、18h、24h后,LPS组前列腺癌细胞PC3的OD值均上调,总体呈增殖趋势,其中18h、24h增殖较明显(P<0.01),差异有统计学意义,LPS对PC3细胞的增殖具有时间依赖性;LPS处理24h,,相对于对照组,细胞上清液IL-6和TNF-α分泌均提高(P<0.01),差异有统计学意义;炎症相关蛋白NF-kB p65和IkB-α表达水平无明显变化(P=0.62>0.05,P=0.78>0.05),其蛋白磷酸化水平提高(P<0.05);经过24h处理,LPS组与Control组相比,TLR4和AR、NF-kB p65的mRNA转录表达显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。2.相对于LPS组,在Rh2处理前列腺癌细胞PC3后,Rh2组的OD值均下降,总体呈增殖抑制趋势(P<0.05),差异有统计学意义,Rh2对经LPS处理的PC3细胞增殖具有时间和浓度依赖性。Rh2处理24h,相对于LPS组,细胞上清液IL-6和TNF-α分泌均下降(P<0.01),Rh2-60+LPS组比Rh2-60组下降更低(P<0.05),差异有统计学意义;Rh2处理24h,相对于LPS组,炎症相关蛋白NF-kB p65和IkB-α表达水平无明显变化(P=0.244>0.05,P=0.25>0.05),其蛋白磷酸化水平降低(P<0.05),Rh2-60+LPS组比Rh2-60组下降更低(P<0.05);经过24h处理,Rh2-60组与LPS组相比,TLR4和AR、NF-kB p65的mRNA转录水平下降明显(P<0.01),Rh2-60+LPS组比Rh2-60组下降更低(P<0.05),差异有统计学意义。结论1.PC3细胞中TLR4激活可引起胞内炎症水平提高,这可能与雄激素受体AR的活化、细胞增殖相关。2.人参皂苷Rh2能抑制PC3细胞中TLR4的活化从而降低胞内炎症水平,可能有助于下调雄激素受体AR的表达,抑制细胞生长。
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