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目的:目前,缺氧对右心室心肌细胞凋亡的作用尚不明确,右心室心肌肥大与心肌细胞凋亡的关系以及右心室心肌细胞凋亡的发生发展和机制也不清楚。故通过建立慢性缺氧心肌肥大大鼠模型,研究抗凋亡基因bcl-2和促凋亡基因bad在右心室心肌细胞中表达的变化,探讨慢性缺氧致大鼠心肌细胞凋亡的发生规律及其机制。
方法:1.建立慢性缺氧大鼠模型:大鼠置于正常气压下行慢性持续缺氧(氧浓度控制在9.5%~10.5%)。
2.实验分组和处理:采用析因设计方法,将大鼠随机分为慢性缺氧组和正常对照组,并于实验的第14天,第21天和第28天分批将各组大鼠处死。
3.检测RV/(LV+S),RV/BW比值,用Hoechst33258双染色法进行形态学观察,用原位末端标记(TUNEL)法进行心肌细胞凋亡形态及计量分析,用RT-PCR检测β-MHC,bcl-2,bad等mRNA的表达水平,用WesternBlotting检测β-MHC,bcl-2,bad等蛋白的表达水平。
结论:1.慢性缺氧可以诱导大鼠右心室心肌细胞凋亡和心肌肥大,且大鼠右心室心肌细胞凋亡和心肌肥大程度随着缺氧时间的延长而增加。
2.慢性缺氧通过抑制大鼠右心室心肌细胞抗凋亡基因bcl-2表达,使bcl-2/bad比值下调,打破原有的平衡,导致心肌细胞凋亡。