SCD1对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭及增殖能力的影响

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目的探究硬脂酰辅酶A去饱和酶1(Stearoyl-Coenzyme A desaturase1,SCD1)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭及增殖能力的影响,并初步观察SCD1对人乳腺癌MDA-MB-231细胞上皮组织间充质化(EMT)相关蛋白的改变,为SCD1在乳腺癌的防治中提供理论基础。方法1.将干扰SCD1基因三个不同位点的SCD1-siRNA利用脂质体转染的方法转染至人乳腺癌MDA-MB-231细胞,分别作为siRNA1组,siRNA2组,siRNA3组,以及未被转染siRNA的阴性对照组(NC组)。2.转染siRNA后,通过蛋白质免疫印迹(western blot,WB)检测各组细胞中SCD1蛋白被干扰后的表达情况。3.用MTT法检测人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖能力;采用划痕实验检测乳腺癌细胞迁移能力;Transwell体外侵袭实验检测乳腺癌细胞侵袭能力。4.利用WB技术检测SCD1干扰后乳腺癌MDA-MB-231细胞中上皮组织间充质化(EMT)相关蛋白的表达情况,进一步验证和分析SCD1对人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭及增殖的影响。结果1.WB检测显示:转染SCD1-siRNA后的三组人乳腺癌MDA-MB-231细胞,SCD1蛋白表达较转染siRNA的阴性对照组(NC组)明显减少(P<0.05)。2.MTT实验显示:转染SCD1-siRNA后,SCD1表达抑制,人乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移增殖能力显著减弱(P<0.05)。3.Transwell侵袭实验显示:转染SCD1-siRNA后,SCD1表达抑制,人乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭能力显著减弱(P<0.05)。4.划痕实验显示:转染SCD1-siRNA后,SCD1表达抑制,人乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移能力显著减弱(P<0.05)。5.WB检测显示:转染SCD1-siRNA后,SCD1表达抑制,人乳腺癌MDA-MB-231细胞E-cadherin表达增加,N-cadherin和β-catenin的表达均减少(P<0.05)。结论1.SCD1增加MDA-MB-231细胞体外侵袭、迁移及增殖能力。2.SCD1影响人乳腺癌MDA-MB-231细胞EMT相关蛋白表达。
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