一、研究背景与目的脂肪栓塞综合征(FES)通常发生在严重创伤后,是骨科的严重并发症之一,其病理过程复杂,发病机理尚未完全阐明。目前对FES的预防主要包括三部分：早期制动、手术预防、药物预防,其中药物预防中尚无特效药物。有文献报道糖皮质激素、低分子右旋糖酐对FES有防治作用；临床观察发现地塞米松联合低分子右旋糖酐预防FES效果优于单独使用低分子右旋糖酐、地塞米松,但尚缺乏相关的动物实验证实。本实验以油酸静脉注射建立FES动物模型,观察低分子右旋糖酐、糖皮质激素或二者联用对FES的预防作用效果及其机制,为临床应用提供理论依据。二、方法实验一：健康雄性Wistar大鼠80只,体重300g-320g,随机化分为4组：低分子右旋糖酐组(A组)、甲基强的松龙组(B组)；甲基强的松龙及低分子右旋糖酐联用组(C组)；空白组(D组),每组20只。用10%水合氯醛溶液(0.3ml/100g)腹腔注射麻醉大鼠。麻醉满意后,将大鼠俯卧固定于手术板上,于尾静脉留置套管针,注射相应药物,并于1h、2h、3h、4h取血标本及肺标本,观察四组动物各个时间点肺组织病理变化(HE染色、亚甲蓝染色、电镜)、动脉血氧分压(Pa02)、白细胞计数、肿瘤坏死因子-a(TNF-a).髓过氧化物酶(MPO)等指标,结果采用SPSS13.0统计软件进行统计分析。实验二：健康雄性Wistar大鼠20只,体重300g-320g,随机化分为4组,低分子右旋糖酐组(A组)；地塞米松组(B组)；地塞米松及低分子右旋糖酐联用组(C组)；空白组(D组),每组5只。用10%水合氯醛溶液(0.3ml/100g)注入腹腔麻醉大鼠。麻醉满意后,将大鼠俯卧固定于手术板上,于尾静脉留置套管针。于尾静脉注射相应药物,4h时行大鼠白细胞计数、Pa02,放血法处死大鼠,取肺组织进行肺组织病理变化(HE染色、亚甲蓝染色、电镜)、TNF-α、MPO等指标检测,结果采用SPSS13.0统计软件进行统计分析。三、结果实验一结果：1、PaO2各组PaO2在注射油酸后1h、2h、3h、4h均呈进行性上升,但D组低平,PaO2上升缓慢。1h、2h、3h、4h均为C组>B组>A组>D组。各组Pa02测定结果统计分析显示：四组之间差异有显著性意义(F=41.076,P=0.000)；时间的4个不同水平差异有显著性意义(F=34.939,P=0.000)。2、白细胞计数各组白细胞计数在注射油酸后1h、2h、3h、4h均呈进行性上升,但D组低平,白细胞上升缓慢。1h时B组>A组>C组>D组,2h、3h、4h均为C组>B组>A组>D组。各组白细胞计数测定结果统计分析显示：四组之间差异有显著性意义(F=4.258,P=0.022)；时间的4个不同水平差异有显著性意义(F=25.062,P=0.000)(P<0.05,差异有统计学意义)。3、TNF-a测定结果随时间变化各组TNF-a值先上升,后下降,各组在注射油酸后2h达高峰,4h时TNF-a含量均低于初始值。1h、2h、3h、4h均为D组>A组>B组>C组。1h、2h、3h、4h时四组之间差异均有统计学意义(F=50.074,P=0.000; F=46.388,P=0.000; F=67.575,P=0.000; F=73.879,P=0.000)。1h、3h时,各组之间差异有统计学意义(P<0.05)；2h时,除A、D组(P=0.679)和B、C组(P=0.196)外,各组之间差异有统计学意义(P<0.05)；4h时,除A、B(P=0.070),B、C组(P=0.063)外,各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。4、MPO测定结果随时间变化各组MPO值先上升,后下降,各组在注射油酸后3h达高峰。4h时D组、A组MPO含量高于初始值,B组、C组MPO含量低于初始值。1h、2h、3h、4h均为D组>A组>B组>C组。1h.2h、3h、4h时四组之间均有统计学差异(F=13.257, P=0.000；F=23.716,P=0.000；F=6.204,P=0.005；F=73.285,P=0.000).2h.4h时,各组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)；1h时,除A、D组(P=0.216),B、C组(P=0.147)外,各组之间比较差异有统计学意义(P<0.05,)；2h时除B、C组之间没有差异外(P=0.104),其余各组之间比较差异有统计意义；3h时,除D、A组(P=0.283),A、B组(P=0.245),B、C组(P=0.091)外,各组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)；4h时,各组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。5、HE染色术后4小时肺组织切片,HE染色显示：A组、B组肺泡间质水肿,肺泡腔渗出较D组轻微；C组肺泡间质水肿,肺泡腔渗出轻微；D组肺泡间质水肿,肺泡腔显著出血、渗出最为严重。6、亚甲蓝染色术后4小时肺组织行半薄切片,亚甲蓝染色显示：A组、B组肺泡间质水肿,肺泡腔渗出较D组轻微；C组肺泡间质水肿,肺泡腔渗出轻微；D组肺泡间质水肿,肺泡腔显著出血、渗出最为严重。7、透射电子显微镜下超微病理术后4小时肺组织行超薄切片,铀—铅复染色显示：A组、B组：可见油酸滴、白细胞、纤维素、Ⅱ型细胞内线粒体不同程度肿胀；C组：Ⅱ型细胞,细胞内板层小体良好,肺泡腔内有单核细胞及红细胞；D组：肺泡腔中有巨噬细胞、纤维素等渗出,Ⅱ型细胞退变,胞浆内板层小体破裂。实验二结果：1、PaO24h时C组>B组>A组>D组。各组Pa02测定结果经统计分析显示：四组之间有统计学差异(F=19.717,P=0.000)。两两比较的结果：A、D组(P=0.456)没有显著性差异,其余各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。2、白细胞计数4h时D组>A组>B组>C组。各组白细胞测定结果经统计分析显示：四组之间无统计学差异(F=2.051,P=0.147)。3、TNF-a测定结果4h时D组>A组>B组>C组。各组肺组织TNF-a测定结果经统计分析显示：四组之间差异有统计学意义(F=5.341,P=0.024)。Dunnett’s T3方法做多重比较,两两之间均无显著性差异。4、MPO测定结果4h时D组>B组>A组>C组。各组肺组织MPO测定结果经统计分析显示：四组之间均有统计学差异(F=5.743,P=0.007)。除A、B组(P=0.305),A、C组(P=0.257)外,其余各组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。5、HE染色术后4小时肺组织切片,HE染色显示：D组：肺泡腔内有嗜中性粒细胞、巨噬细胞浸润,肺泡腔及间质水肿、充血,肺叶有灶性坏死、肺不张等现象；C组：肺泡腔内嗜中性粒细胞、巨噬细胞渗出较少,肺泡腔及间质水肿、充血轻微；A组、B组较D组水肿、渗出有不同程度减轻。6、透射电子显微镜下超微病理术后4小时肺组织行超薄切片,铀—铅复染色显示：A组、B组：白细胞、纤维素等渗出、Ⅱ型细胞内线粒体不同程度肿胀；C组：毛细血管内皮肿胀,腔内未见脂滴,Ⅱ型细胞退变不明显,胞浆内板层小体略肿胀；D组：肺小血管内有脂滴,血管腔内有微血栓形成,血管内皮细胞肿胀,基膜增厚,Ⅱ型细胞退变,胞浆内板层小体破裂。四、结论1、糖皮质激素联合低分子右旋糖酐具有预防FES作用,其中,甲基强的松龙联合低分子右旋糖酐预防FES效果优于单用甲基强的松龙、低分子右旋糖酐；地塞米松联合低分子右旋糖酐预防FES效果优于单用地塞米松、低分子右旋糖酐。2、糖皮质激素联合低分子右旋糖酐预防FES的机制可能是两者共同稳定巨噬细胞和中性粒细胞的细胞膜,从而减少相应细胞因子TNF-α、MPO的生成或低分子右旋糖酐减轻白细胞聚集,糖皮质激素稳定巨噬细胞和中性粒细胞的细胞膜,从而分别阻断了不同的病理过程。