第一部分子痫前期样孕鼠模型的建立及辅酶Q10疗效评价目的使用一氧化氮合成酶(nitric oxide synthase, NOS)抑制剂—左旋硝基精氨酸甲酯(L-nitro-arginine-methyl ester，L-NAME)建立子痫前期样孕鼠模型，从血压、24小时尿蛋白定量、肝功能、子代结局等方面评价辅酶Q10治疗子痫前期样孕鼠中的疗效。方法1．子痫前期样孕鼠模型建立：妊娠第10-14天给予L-NAME125mg/kg/d皮下注射，妊娠第2天开始隔日无创测量血压，若较孕前血压升高30mmHg或以上则认为建模成功。2．实验分组：选择SD(Sprague-Dawley)孕鼠30只，随机分为3组：正常妊娠组（n=10）及模型组（n=20，再分为辅酶Q10组与蒸馏水组，每组各10只孕鼠）。模型组：妊娠第10-14天予L-NAME125mg/kg/d皮下注射，正常妊娠组：妊娠第10-14天予同剂量生理盐水皮下注射；辅酶Q10组：妊娠第15-20天予辅酶Q1060mg/kg/d灌胃；蒸馏水组：妊娠第15-20天予同剂量蒸馏水灌胃。3．血压、尿蛋白及肝功能测量：采用无创鼠尾血压检测方法，分别于孕前1周、妊娠第2天开始隔日测量血压；收集妊娠前、妊娠第10天、妊娠第15天、妊娠第20天24小时尿液进行尿蛋白定量分析；妊娠第21天留取心脏血，进行丙氨酸氨基转移酶（Alanine aminotransferase，ALT）及门冬氨酸氨基转移酶（Aspartateaminotransferase，AST）检测。4．子代结局评价：妊娠第21天，剖宫术取出鼠胎、胎盘，计数正常鼠胎数，称取鼠胎及胎盘重量。结果1．各组血压变化：妊娠前、妊娠第10天正常妊娠组及模型组（辅酶Q10组与蒸馏水组）孕鼠血压比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)；妊娠第15天模型组血压较孕前均升高，差异有统计学意义(P＜0.05)，亦高于正常妊娠组，差异有统计学意义(P＜0.05)；妊娠第21天蒸馏水组孕鼠血压继续维持在较高水平，与妊娠第15天比较，差异无统计学意义；而辅酶Q10组妊娠第21天血压较妊娠第15天下降，且低于蒸馏水组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，较正常妊娠组升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。2.各组24小时尿蛋白定量变化：比较三组孕鼠妊娠前、妊娠第10天24小时尿蛋白定量，差异无统计学意义；妊娠第15天，模型组24小时尿蛋白定量较妊娠前均升高，差异有统计学意义(P＜0.05)，亦高于正常妊娠组，差异有统计学意义(P＜0.05)；妊娠第20天，蒸馏水组尿蛋白高于正常妊娠组，辅酶Q10组尿蛋白低于蒸馏水组、高于正常妊娠组，分别比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)。3.各组肝功能变化：蒸馏水组ALT及AST均显著高于正常妊娠组，辅酶Q10组ALT及AST则较蒸馏水组显著降低，但仍较正常妊娠组升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。4.各组子代妊娠结局：蒸馏水组鼠胎数、鼠胎重量均低于正常妊娠组，差异均有统计学意义(P＜0.05)；辅酶Q10组鼠胎数、鼠胎重量均较蒸馏水组升高，差异均有统计学意义(P＜0.05)，低于正常妊娠组，差异均有统计学意义(P＜0.05)；模型组胎盘重量均低于正常妊娠组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，辅酶Q10组胎盘重量高于蒸馏水组，差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论妊娠第10-14天给予L-NAME125mg/kg/d皮下注射可以充分模拟子痫前期主要表现，成功建立子痫前期样孕鼠模型；予辅酶Q10治疗可以有效改善子痫前期样孕鼠病理生理表现，改善子代结局。第二部分辅酶Q10对子痫前期样孕鼠的肝脏保护作用及其机制的研究目的通过分析子痫前期样孕鼠肝脏氧化应激损伤水平及细胞凋亡水平的变化，探讨辅酶Q10在治疗子痫前期样孕鼠肝脏中的抗氧化应激损伤及抗细胞凋亡的作用机制。方法1.实验分组：选择SD孕鼠50只，随机分为正常妊娠组（n=10）与模型组（n=40，均为子痫前期样孕鼠，再分为蒸馏水组、辅酶Q10组、硫酸镁+辅酶Q10组及硫酸镁组，每组各10只孕鼠）。妊娠第10-14天：模型组予左硝基精氨酸甲酯125mg/kg/d皮下注射，建立子痫前期样孕鼠模型；正常妊娠组予同剂量生理盐水皮下注射。妊娠第15-20天：蒸馏水组予蒸馏水1ml灌胃；辅酶Q10组予辅酶Q1060mg/kg/d灌胃；硫酸镁+辅酶Q10组予硫酸镁120mg/kg/d皮下注射+辅酶Q1060mg/kg/d灌胃；硫酸镁组予硫酸镁120mg/kg/d皮下注射+蒸馏水1ml灌胃。2.氧化应激损伤水平及抗氧化酶检测：检测肝脏组织丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量、过氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase, GSH-PX）活性。3.细胞凋亡检测：提取肝脏组织蛋白， Western-blot法检测肝脏组织活化Caspase-3、Bcl-2及Bax蛋白表达水平。结果1.各组血压变化：孕前正常妊娠组及模型组（蒸馏水组、辅酶Q10组、硫酸镁+辅酶Q10组及硫酸镁组）孕鼠血压比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；妊娠第15天模型组孕鼠血压较孕前均升高，差异有统计学意义（P＜0.05），也高于正常妊娠组，差异有统计学意义（P＜0.05）；妊娠第21天蒸馏水组孕鼠血压继续维持在高水平，与妊娠第15天比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；硫酸镁+辅酶Q10组、硫酸镁组、辅酶Q10组妊娠第21天血压较妊娠第15天下降，且低于蒸馏水组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；辅酶Q10组较正常妊娠组仍升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。2.各组24小时尿蛋白定量变化：比较各组孕鼠妊娠前、妊娠第10天24小时尿蛋白定量，差异无统计学意义；妊娠第15天，模型组（蒸馏水组、辅酶Q10组、硫酸镁+辅酶Q10组及硫酸镁组）24小时尿蛋白定量较孕前均升高，差异有统计学意义（P＜0.05），也高于正常妊娠组，差异有统计学意义（P＜0.05）。妊娠第20天，蒸馏水组尿蛋白高于正常妊娠组，差异有统计学意义（P＜0.05）；硫酸镁+辅酶Q10组、硫酸镁组、辅酶Q10组低于蒸馏水组，差异有统计学意义（P＜0.05），仍高于正常妊娠组，差异有统计学意义（P＜0.05）。3.各组肝功能变化：蒸馏水组ALT及AST均高于正常妊娠组，差异有统计学意义（P＜0.05）；硫酸镁+辅酶Q10组、硫酸镁组、辅酶Q10组ALT及AST较蒸馏水组降低，较正常妊娠组升高，差异均有统计学意义（P＜0.05）。4.各组子代妊娠结局：蒸馏水组鼠胎数、鼠胎重量均显著低于正常妊娠组，硫酸镁+辅酶Q10组、硫酸镁组、辅酶Q10组鼠胎数、鼠胎重量均较蒸馏水组升高，差异有统计学意义（P＜0.05），三组之间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；仍低于正常妊娠组，差异有统计学意义（P＜0.05）。模型组胎盘重量均低于正常妊娠组，差异有统计学意义（P＜0.05），硫酸镁+辅酶Q10组、硫酸镁组及辅酶Q10组均高于蒸馏水组，差异有统计学意义（P＜0.05）；三组之间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。5.各组肝脏GSH-PX及SOD活性水平：模型组肝脏GSH-PX及SOD活性水平均低于正常妊娠组，两两比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。辅酶Q10组与蒸馏水组、硫酸镁组比较均升高，分别比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。硫酸镁+辅酶Q10组与蒸馏水组比较升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与辅酶Q10组比较轻度升高，但差异无统计学意义（P＞0.05）；与硫酸镁组比较亦升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。硫酸镁组与蒸馏水组比较升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。6.各组肝脏MDA水平：正常妊娠组肝脏MDA水平为（5.49±0.32）nmol/mg protein，模型组肝脏MDA水平均高于正常妊娠组，两两比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。蒸馏水组、辅酶Q10组、硫酸镁+辅酶Q10组及硫酸镁组分别为（9.38±0.51）nmol/mg protein、（6.80±0.32）nmol/mg protein、（6.86±0.45）nmol/mg protein及（7.73±0.28）nmol/mg protein，除辅酶Q10组与硫酸镁+辅酶Q10组比较，差异无统计学意义（P＞0.05），其余各组间两两比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。7.各组肝脏组织活化Caspase-3、Bcl-2及Bax蛋白水平：蒸馏水组孕鼠肝脏组织活化Caspase-3及Bax蛋白较正常妊娠组、硫酸镁+辅酶Q10组、硫酸镁组、辅酶Q10组增多，Bcl-2较正常妊娠组减少，差异均有统计学意义（P＜0.05），模型组经过硫酸镁、辅酶Q10治疗后与蒸馏水组比较，活化Caspase-3及Bax蛋白表达减少（P＜0.05），Bcl-2蛋白表达增多，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论子痫前期样孕鼠肝脏组织氧化应激水平、细胞凋亡水平均升高；辅酶Q10可以有效改善子痫前期样孕鼠肝功能，减少肝脏细胞凋亡，具有保护肝脏的作用，其机制可能是通过抗氧化应激损伤和调节Bcl-2/Bax平衡从而抑制细胞凋亡。