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MART-1aa26-35*A27L疫苗多肽特异性的细胞毒性T细胞（Cytotoxic T cell,CTL）能有效裂解表达HM1.24的多发性骨髓瘤（Multiple myeloma,MM）细胞,但是该多肽的半衰期较短,以致其免疫原性较差,不能有效诱导肿瘤特异性CTL免疫应答的产生。寻找疫苗多肽的优良载体以保护疫苗多肽快速有效的到达抗原递呈细胞（Antigen-presenting cell,APC）,以被APCs快速大量摄取与加工递呈,是提高抗肿瘤疫苗疗效的关键研究策略。脂质体（Liposome,LP）和非离子表面活性剂囊泡（Nonionic surfactant vesicle,NS）是最常用的纳米递送系统,具有生物相容性、生物可降解性、靶向性、延长血液循环时间、低毒性等优点。更重要的是,其可以模拟肿瘤细胞的尺寸、形态等特性,能最大程度的激活抗肿瘤免疫反应以消除肿瘤细胞。因此,本研究利用LP和NS包载MART-1aa26-35*A27L多肽,研究这两种纳米疫苗诱导MART-1aa26-35*A27L特异性CTL免疫应答的效果以及差异,为进一步研究和推广肿瘤纳米疫苗奠定基础。研究方法:（1）建立反相高效液相色谱法（RP-HLPC）测定MART-1aa26-35*A27L的体外分析方法,并采用薄膜分散法制备MART-1aa26-35*A27L脂质体纳米疫苗(MART-1aa26-35*A27L-LP)和MART-1aa26-35*A27L类脂囊泡纳米疫苗(MART-1aa26-35*A27L-NS),以及利用正交试验优化纳米疫苗的制备处方和工艺。最后,对所制备得到的MART-1aa26-35*A27L-LP和MART-1aa26-35*A27L-NS进行包括外观、形态、粒径、Zeta电位、多分散系数（Polydispersity indices,PDI）、包封率以及载药量等药剂学性质方面的表征。（2）采用健康供者外周血作为标本,从中分离外周血单个核细胞（Peripheralblood mononuclear cell,PBMNC）。其中一部分用于冻存,用作T细胞来源使用;另一部分进行体外培养、诱导形成非成熟树突状细胞（Immature dendritic cell,imDC）后,将其平均分成7个实验组,每个组分别给予MART-1aa26-35*A27L-LP、MART-1aa26-35*A27L-NS、空白LP（LP-Blank）、空白NS（NS-Blank）、游离MART-1aa26-35*A27L(MART-1aa26-35*A27L-PBS)、PBS以及阳性给药处理,以刺激、诱导形成成熟DC（Mature dendritic cell,mDC）。此后,将诱导形成的各组mDCs,分别与等量的T细胞（之前冻存备用的PBMNCs）共同培养,以进行DCs细胞刺激特异性T细胞活化增殖。最后,收集各组T细胞,并分离出各组CD56-CD8+T细胞,研究并比较各组活化的特异性CD56-CD8+CTL细胞的数目、颗粒酶B（granzyme B）的量、DC细胞表面成熟相关标志物的表达。研究结果与结论:（1）本研究通过薄膜分散法制备了MART-1aa26-35*A27L-LP,并通过正交试验优化了MART-1aa26-35*A27L-LP的制备处方和工艺。结果显示,MART-1aa26-35*A27L-LP的最优制备处方和工艺是磷脂终浓度为10μg/mL、磷脂与胆固醇质量比为6:1、多肽终浓度为1mg/mL以及水合时间为30min。（2）本研究通过RP-HLPC建立了MART-1aa26-35*A27L的体外分析方法,并通过粒径分析仪和透射电镜对制备的MART-1aa26-35*A27L-LP和MART-1aa26-35*A27L-NS进行了表征。结果显示,MART-1aa26-35*A27L-LP和MART-1aa26-35*A27L-NS的平均包封率分别为49.4%、52.89%,平均载药量分别为4.06%、6.22%,平均粒径分别为192.4nm、207.50nm,平均Zeta电位分别为-9.41mv、-12.50mv,平均PDI分别为0.27、0.15。（3）本研究通过体外人源细胞实验检测了MART-1aa26-35*A27L-LP、MART-1aa26-35*A27L-NS和MART-1aa26-35*A27L-PBS等诱导的CTL免疫应答。结果显示,MART-1aa26-35*A27L-LP和MART-1aa26-35*A27L-NS均能显著促进CD80在DC表面的表达,并能显著提高CD56-CD8+CTLs数目,且这些CD56-CD8+CTLs会产生大量的granzyme B。