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香梨“黑头病”(当地果农自称)是库尔勒香梨贮藏期间的一种新型病症,经调查其发病率为4%~10%,多发生在贮藏第二年的2~4月,目前由于不了解其发病原因,从而缺乏有效地防治措施。本论文以黑头病香梨为研究材料,通过从黑头病香梨上分离、纯化病原菌,将其回接在未致病香梨上确定其致病菌,应用传统真菌形态学鉴定和rDNA-ITS分子标记分析相结合的方法对致病菌进行鉴定,并对致病菌生物学特性进行研究;同时将致病菌回接完好香梨,研究黑头病香梨采后贮藏期间的发病规律,为香梨黑头病的抗病性研究及防治措施提供理论依据。研究的主要结果如下:
1、香梨黑头病病原菌的分离鉴定:侵染黑头病香梨的病原菌有七株病原菌,分属于枝孢属(Cladosporiuwi)、青霉属(Penicillium)、链格孢属(Alternaria)和曲霉属(Aspergillus),同时通过致病性试验确定致病菌为真菌界(Fungi)半知菌亚门(DeuteroYY/ycotina)丝孢纲(llyphomycetes)丝孢目(llyphomycetales)暗色孢科(Dematiaceae)枝抱属(Cladosporiznn)。依据形态学特性和应用rDNA-ITS分子标记分析并鉴定其致病菌为多主枝孢菌(CladosporiumherbarumLink)。
2、致病菌的致病性试验研究表明:香梨黑头病致病部位主要是萼部,胴体和尾部难以致病;同时宿萼果比脱萼果易发病,有伤接种比无伤接种易发病。
3、香梨黑头病致病菌生物学特性的研究表明:致病菌最适培养基为梨果汁(2096)培养基;生长温度范围为5℃~40℃,最适生长温度和产孢的最适温度均为25℃;最适pH为7.0;连续光照条件下致病菌的菌落直径生长快同时产孢量大;氮源(硝酸铵和硫酸铵)和碳源(乳糖和甘露糖)对致病菌有抑制作用,最适氮源为氯化铵、蛋白胨、尿素和酵母浸膏,最适碳源为可溶性淀粉、葡萄糖和甘油;随着温度的上升其致死率迅速上升,分生孢子的致死温度为65℃;随着紫外线辐照时间的延长致死率逐渐加强,辐照9min后其致死率为98.8%。
4、香梨接种黑头病致病菌在不同贮藏条件下发病率和病斑面积的变化研究表明:常温贮藏条件下,梨果发病时期短且发病率和病斑面积增长最迅速,其次为冷库贮藏,最后为气调贮藏;三种不同贮藏条件都可以得出宿萼果比脱萼杲发病率高。
5、香梨接种黑头病致病菌生理指标的测定研究表明:宿萼果与脱萼果相比,硬度和可溶性固形物偏低,N、P、K、B、N/Ca和KJCa的含量高,而Ca的含量明显偏低;PPO、POD和PAL三种酶在梨果实接种致病菌感病后,其活性有一定幅度的升高,PPO活性与POD活性均是病斑处和病斑外5mm高于病斑外5-10mm;PAL活性为病斑外5mm和病斑外5-10mm高于病斑处。
1、香梨黑头病病原菌的分离鉴定:侵染黑头病香梨的病原菌有七株病原菌,分属于枝孢属(Cladosporiuwi)、青霉属(Penicillium)、链格孢属(Alternaria)和曲霉属(Aspergillus),同时通过致病性试验确定致病菌为真菌界(Fungi)半知菌亚门(DeuteroYY/ycotina)丝孢纲(llyphomycetes)丝孢目(llyphomycetales)暗色孢科(Dematiaceae)枝抱属(Cladosporiznn)。依据形态学特性和应用rDNA-ITS分子标记分析并鉴定其致病菌为多主枝孢菌(CladosporiumherbarumLink)。
2、致病菌的致病性试验研究表明:香梨黑头病致病部位主要是萼部,胴体和尾部难以致病;同时宿萼果比脱萼果易发病,有伤接种比无伤接种易发病。
3、香梨黑头病致病菌生物学特性的研究表明:致病菌最适培养基为梨果汁(2096)培养基;生长温度范围为5℃~40℃,最适生长温度和产孢的最适温度均为25℃;最适pH为7.0;连续光照条件下致病菌的菌落直径生长快同时产孢量大;氮源(硝酸铵和硫酸铵)和碳源(乳糖和甘露糖)对致病菌有抑制作用,最适氮源为氯化铵、蛋白胨、尿素和酵母浸膏,最适碳源为可溶性淀粉、葡萄糖和甘油;随着温度的上升其致死率迅速上升,分生孢子的致死温度为65℃;随着紫外线辐照时间的延长致死率逐渐加强,辐照9min后其致死率为98.8%。
4、香梨接种黑头病致病菌在不同贮藏条件下发病率和病斑面积的变化研究表明:常温贮藏条件下,梨果发病时期短且发病率和病斑面积增长最迅速,其次为冷库贮藏,最后为气调贮藏;三种不同贮藏条件都可以得出宿萼果比脱萼杲发病率高。
5、香梨接种黑头病致病菌生理指标的测定研究表明:宿萼果与脱萼果相比,硬度和可溶性固形物偏低,N、P、K、B、N/Ca和KJCa的含量高,而Ca的含量明显偏低;PPO、POD和PAL三种酶在梨果实接种致病菌感病后,其活性有一定幅度的升高,PPO活性与POD活性均是病斑处和病斑外5mm高于病斑外5-10mm;PAL活性为病斑外5mm和病斑外5-10mm高于病斑处。