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自由基与人体健康有着密切的关系,近年来关于抗氧化的研究也越来越多,荧光法由于在测定自由基方面具有准确度高,干扰小的优点,受到国内外许多学者的的关注。因此寻找更为合适的荧光探针用于抗氧化方面的研究显得尤为重要。香豆素类化合物具有较好的荧光性能,荧光强度与7位供电基向香豆素环内的内酯键中的羰基发生分子内电荷转移有关,各种荧光性能可通过香豆素母体上吸供电子基团的修饰来实现。本实验在香豆素的7位上引入硼酸频那醇脂基,提高了香豆素的反应活性,使其能和羟自由基和超氧自由基发生反应,生成强荧光化合物7-羟基香豆素,通过测定反应前后的荧光强度的变化来确定自由基的含量,可以用作氧自由基的测定。本实验目的为合成一种新型荧光探针,试用于体外抗氧化研究,为抗氧化研究寻求一种新的更为合适的荧光探针。为抗氧化方面的研究提供一个新的方法。目的合成7-硼酸频那醇脂香豆素,通过一些分析方法确定其为目标产物,并考察其荧光性质,研究其最大吸收波长以及各种条件对其荧光强度的影响,包括pH值、缓冲液的种类、温度、反应时间等等;将其用作抗氧化剂的体外、体内抗氧化实验,并通过与传统方法的比较,考察其应用前景。方法1.通过磺酸化反应得到7-三氟甲烷磺酸基香豆素,再进一步取代生成7-硼酸频那醇脂香豆素;2.7-硼酸频那醇脂香豆素分别与不同的自由基反应,有很好的响应,考察各种条件对荧光强度的影响;3.通过与传统方法测定VitC及真菌多糖类化合物的体外抗氧化能力的比较,分析其准确度和灵敏度,比较两种方法的优缺点;结果合成了7-硼酸频那醇脂香豆素,而且具有较高的收率,收率为78.3%,并对过氧化氢、羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基均有很好的响应;通过应用于VitC及真菌多糖类化合物的体外抗氧化能力的测定,与传统方法相比有较高的准确度和灵敏度,并且干扰小的优点,能够应用于在激发波长为330nm,发射波长为453nm下无荧光干扰的抗氧化体系的考察其体外清除自由基、抗氧化的能力;该探针应用于抗氧化剂的体内抗氧化作用的研究有待进一步研究。结论7-硼酸频那醇脂香豆素是一种水溶性的荧光探针,能与多种自由基反应生成强荧光物质7-羟基香豆素;通过用于VitC及真菌多糖类化合物的体外抗氧化能力的测定,与传统方法相比有较高的准确度和灵敏度,并且具有干扰小的优点,为在激发波长为330nm,发射波长为453nm下无荧光干扰的抗氧化剂体外清除自由基、抗氧化的能力的测定提供一种新的方法。