血清白蛋白及多肽与小分子的相互作用研究及纳米材料在其中的应用

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wslin001
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本文旨在从分子水平上研究和阐述日常生活中常见的食品、药品分子与蛋白质以及金属离子与多肽的作用,探讨这几种小分子对蛋白质或多肽结构和构象的影响,对其使用的安全性进行评估。本工作在pH=7.4的环境下采用多种光谱学方法、原子力显微镜以及化学计量学方法,研究了食用色素(日落黄和β-胡萝卜素)、手性农药(异丙甲草胺)以及抗癌药物(10-羟基喜树碱)与牛血清白蛋白(BSA)的作用,获得了相互作用过程的定性和定量信息;考察了金属离子A13+对阿尔海默病(AD)β-淀粉样蛋白(Aβ)聚集的影响,探讨了Al3+与AD可能的联系。最后还尝试研究了两种纳米材料在药物载体和药物治疗方面的应用。本论文的工作主要包括以下几点:1.采用多种光谱学测试手段研究日落黄和p-胡萝卜素与BSA的相互作用,获得它们与BSA结合过程的一些基本信息以及对BSA构象的影响,并且对两者在与BSA作用中的所表现出来的差异进行了比较。通过比较得出,日落黄会引起BSA结构和构象的变,而相对来说,p-胡萝卜素是一种较为安全的食用色素。2.采用荧光光谱法和紫外-可见光谱法以及MCR-ALS方法研究在模拟人体生理环境中RAC-异丙甲草胺(RACmt)和S-异丙甲草胺(Smt)与BSA的相互作用。结果表明Smt与BSA的结合常数大于RACmt和BSA的结合常数,S型和R型两种异构体分别结合在BSA的结合位点Ⅰ位和Ⅱ位,且BSA对Smt具有立体选择性,它与Smt的结合能力大于Rmt,即Smt的生物活性大于Rmt,是RACmt中的主要活性成分。3.采用化学计量学方法(MCR-ALS和PARAFAC)和多种光谱分析法以及原子力显微镜研究氧化石墨烯(GO)、10-羟基喜树碱(HCPT)和BSA三者间的相互作用。实验得出:GO对HCPT有良好的负载作用,且GO的存在有利于HCPT和BSA的结合作用,使得HCPT和BSA的结合率增大,便于HCPT在体内的运输和分布。最后BSA对HCPT-GO体系的荧光增强效应构建了BSA传感器,其检测限较低,选择性较好。4.采用多种光谱法和原子力显微镜以及化学计量学方法研究了Al3+对Aβ蛋白的聚集状态和结构的影响,聚乙二醇修饰的Fe304纳米粒子(PEG-Fe3O4)与Aβ及Al3+诱导的Aβ聚合物的相互作用,初步探讨了PEG-Fe3O4作为Aβ清除剂的应用。实验结果均表明Al3+会促进Aβ蛋白的纤维化聚集,通过MCR-ALS计算了两者的结合常数。同时发现PEG-Fe3O4纳米粒子对AβAl3+诱导的Aβ聚合物具有很好的结合和清除能力,揭示了PEG-Fe3O4纳米粒子Aβ清除剂的可能。
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